一株极端嗜盐曲霉的分离鉴定及生物学特性分析（论文）.pdfVIP

中国科技论文在线 一株极端嗜盐曲霉的分离鉴定及生物学特性分析 1，2 1 1 1 1 1 1 刘晓丹 ，刘金亮 ，魏毅 ，田玉平 ，范飞飞 ，潘洪玉 ，张世宏 1 吉林大学植物科学学院植物分子生物学实验室,长春（130062 ） 2 吉林农业科技学院生物工程学院, 吉林吉林（132101 ） E-mail ：xdliu1981@ 摘 要：从晒盐场盐池周边散落的风干野生植被表面分离筛选到 1 株极端嗜盐菌株 CCHA ， 通过形态鉴定及 5.8S rDNA 序列分析等方法对菌株进行鉴定，同时对其生物学特性、耐盐性 及金属耐受性进行了分析。5.8S rDNA 基因序列分析显示菌株 CCHA 与 21 株己报道的曲霉 属菌株同源性为 55.9 %-100 %，表明该菌株为曲霉菌 （Aspergillus sp. ）。其生长温度为 25 ℃ - 45 ℃；生长pH 为 2.5-12.0；其最适培养条件为 35 ℃，pH 5.0-8.0 ，盐浓度为5 %。常温 下，该菌株能在 NaCl 浓度高达 500.0 g/ L 的 PDA 培养基中生存；35 ℃下在含NaCl 310.0 g/ L 的 PDA 培养基中存活 60 d 之久。其对 Cu2+有较强的耐受性。另外该菌株对水稻、大豆、 烟草和黄瓜没有潜在致病性。菌株 CCHA 是一株极端嗜盐且适应温度及 pH 范围较广的曲霉 属菌株，具有重要的潜在应用价值。 关键词：嗜盐曲霉；分离；鉴定；盐度；pH 中图分类号：Q939 1 引 言 嗜盐菌是世界上备受重视的具有重要开发价值的微生物资源 ，嗜盐菌的基因与嗜盐机 制的研究，无论对转基因抗盐植株构建、改造治理盐碱地、环境修复，还是对工业废水处理 及石油污染整治等方面均有着广阔的应用前景。 1914 年，Pierce[1]首次在极端环境下发现嗜盐细菌，引起了微生物学家的广泛关注。长 期以来，这一领域一直被细菌学家独占，因为普遍认为在高盐等极端环境下真核生物是不能 生存的。直到 2000 年，Gunde-Cimerman 等[2]从自然形成的盐地中分离出有活性的真菌。此 后，在世界各地的高盐环境中发现了许多新的耐盐真菌[3,4,5,6,7] 。迄今为止，研究最深入的喜 极端环境的真菌是嗜盐（halophilic ）和耐盐（halotolerant ）真菌。目前，已鉴定的真菌共 106 [8] ，但在其中只有 10 种能在高盐环境下生存。研究最多的耐盐真菌是 Saccharomyces 目 cerevisiae[9]，可在 1.2 mol/L NaCl 的盐度中生长。虽然S. cerevisiae 对盐相当敏感，但却不 能适应高盐条件。而从自然形成的高盐环境中分离的一些耐盐真菌如 Debaryomyces hansenii, Hortaea werneckii 和 Wallemia ichthyophaga 表现出更强的耐盐性，可生长的最高 NaCl 浓度 分别为 3.0 mol/L [10,11] 、5.0 mol/L [12]和 5.2 mol/L [7] 。另外由于这三种耐盐真菌的广泛分布， 已经成为科学家研究高盐条件下适应调节机制的模式生物。随着大量的耐盐真菌的深入研 究，人们发现有些曲霉属（Aspergillus ）及其有性态（Eurotium ）真菌也具有耐盐性和耐旱 性，但目前发现的耐盐曲霉还比较少。Nevo 等[13]从死海及沿岸分离得到 3 种耐盐曲霉 Aspergillus versicolor 、Aspergillus niger 和 Eurotium herbariorum ，并对它们在死海海水中的 生存能力进行了研究。结果表明A. niger 在 100%的死海海水中生存不到 3 周， A. versicolor 能在未稀释的死海水中生存 8 周，A. versicolor 和 E. herbariorum 能在 80%的死海海水中生 存 12 周。Butinar 等[14]在盐度