CN107354125-CN201610300333-一种胎盘潜能细胞及其培养方法.pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 107354125 A (43)申请公布日 2017.11.17 (21)申请号 201610300333.5 (22)申请日 2016.05.09 (71)申请人 上海聚仁生物科技有限公司 地址 200040 上海市静安区延安中路829号 西楼16A (72)发明人 张继岗　王灏川　 (74)专利代理机构 上海三和万国知识产权代理 事务所(普通合伙) 31230 代理人 刘立平 (51)Int.Cl. C12N 5/073(2010.01) 权利要求书2页 说明书9页 附图7页 (54)发明名称 一种胎盘潜能细胞及其培养方法 (57)摘要 本发明提供一种胎盘潜能细胞的培养方法， 包括如下步骤：(1)在无菌条件下获取胎盘细胞 和/或组织；(2)将所述胎盘细胞和/或组织接种 在培养基中培养，并在所述培养基中加入细胞生 长调节剂，以使胎盘潜能细胞生长使所述胎盘细 胞和/或组织进入增殖状态；及(3)培养所述胎盘 潜能细胞，使其持续增殖并具有干细胞特性的细 胞。本发明而且找到了能维持、支持、潜能细胞的 生命物质，用生命物质代替药物；可以通过组织 器官的复制，及时生理性修补组织器官，维持生 命器官的平衡，治疗疑难顽症和疾病，使病人摆 脱医疗痛苦和损伤；并有望用顺应细胞调控的方 A 法，攻克癌症。 5 2 1 4 5 3 7 0 1 N C CN 107354125 A 权　利　要　求　书 1/2页 1.一种胎盘潜能细胞的培养方法，其特征在于：包括如下步骤： (1)在无菌条件下获取胎盘细胞和/或组织； (2)将所述胎盘细胞和/或组织接种在培养基中培养，并在所述培养基中加入细胞生长 调节剂，以使胎盘潜能细胞生长使所述胎盘细胞和/或组织进入增殖状态。 (3)培养所述胎盘潜能细胞，使其持续增殖为具有干细胞特性的细胞。 2.根据权利要求1所述的胎盘潜能细胞的培养方法，进一步包括步骤：增殖后的细胞在 体外诱导的条件下，形成各种组织。 3.根据权利要求1所述的胎盘潜能细胞的培养方法，其特征在于：所述步骤(2)中将所 述胎盘细胞和/或组织接种在培养基中培养包括如下步骤： (2-A)将所述胎盘组织用至少两种抗生素包括：青霉素和链霉素冷磷酸缓冲液(PBS)连 续洗涤至少2次，每次30秒至3分钟； (2-B)将所述胎盘组织置于含双抗的完全培养液中冲洗至少2次，每次30秒至3分钟； 3 (2-C)将所述胎盘组织剪成极小的器官型植块，大小约1-5mm ； (2-D)将植块置于培养板的培养孔中央，间隔约1-5mm，轻轻按压每块植块，使其紧贴培 养板的表面； (2-E)沿着培养孔的边缘，每孔中加入约0.1-1.0ml的完全培养液，勿使培养液与植块 接触； (2-F)将培养板置于37℃，1-10％CO培养箱中预孵育0.5-2小时； 2 (2-G)每个培养孔加完全培养液，轻拿轻放，切勿使植块飘起，加细胞生长调节剂。 4.根据权利要求1所述的胎盘潜能细胞的培养方法，其特征在于：所述步骤(2)中将所 述胎盘细胞和/或组织接种在培养基中培养包括如下步骤： (2-a)为将组织块离散为单个细胞，首先将组织块置入含有至少两种抗生素包括：青霉 素和链霉素的4℃预冷的磷酸缓冲盐水(