液质联用技术的原理与应用2.ppt

真菌毒素（DONs和ZON） 真菌毒素（DONs和ZON） 化合物 母离子（m/z） 子离子（m/z） 所用内标 DON 295.1 264.9* 13C15-DON 138.1 3-ADON 337.1 307.1* 13C15-DON 173.1 15-ADON 337.1 150.1* 13C15-DON 219.0 ZON 317.2 175.0 13C18-ZON 273.2 13C15-DON 310.1 279.0* — 144.9 13C18-ZON 335.3 185.2* — 290.2 *定量离子。 真菌毒素（DONs和ZON） 硝基呋喃代谢物 硝基呋喃代谢物 样品匀浆→加入10mL甲醇-水（1:1）振荡提取→弃去液体→加10mL 0.2mol/L盐酸→均质→加入混合内标标准溶液、邻硝基苯甲醛溶液→置37℃恒温箱中过夜→ 加1mL 0.3mol/L磷酸钾→氢氧化钠调pH7.4 →分别加入10mL乙酸乙酯提取两次→收集乙酸乙酯层→氮吹→残渣用1mL 0.1%甲酸溶解→再用3mL乙腈饱和的正己烷分两次液液分配→下层水相过0.2μm微孔滤膜→取10μL供仪器测定 硝基呋喃代谢物 化合物 母离子（m/z） 子离子（m/z） 2-NP-AOZ 236.2 134.1* 104.2 2-NP-AMOZ 335.2 291.2* 262.3 2-NP-AHD 249.2 133.8* 104.1 2-NP-SEM 209.2 166.2* 192.2 2-NP-D4-AOZ 240.1 134.0* 2-NP-D5-AMOZ 340.1 296.0* 2-NP-13C3-AHD 252.1 134.0* 2-NP-13C15N2-SEM 212.1 168.0* 生活饮用水分析 灭草松和2,4-滴是两种常见的除草剂。 LC由于紫外检测的灵敏度较低，需取大体积水样进行浓缩，否则不能满足卫生标准的检出要求《GB/T 5750-2006生活饮用水标准检验方法》采用GC，水样需先经液液萃取，浓缩后再甲基化衍生，操作步骤较为繁琐 灭草松 2,4-滴 生活饮用水分析 化合物 前体离子（m/z） 产物离子（m/z） 灭草松 238.7 132.0* 175.1 196.9 2,4-滴 221.0 160.8* 162.8 水样→0.45μm滤膜过滤→直接进样分析 基质加标工作曲线 生活饮用水分析 生活饮用水分析 ?化合物 检出限（mg/L） 卫生限量（mg/L） 灭草松 0.0004 0.3 2,4-滴 0.0006 0.03 仪器安装的环境条件 温度、湿度 高分辨率质谱仪要求更严；仪器和操作者在不同的隔离空间； 排风、补风 废弃排放 电压、电流 氮气/零级发生器（噪音、电压、通风） 谢谢！ 离子源 离子源是使样品分子、原子或自由基转变为气相离子的器件，是质谱仪的“门户” 有机MS中几种常见的离子源 电子电离（Electron Ionization，EI）源 化学电离（CI）源 较“软”电离；需要试剂气；适合GC 大气压电离（Atmospheric Pressure Ionization，API）源 基质辅助激光解吸电离（MALDI）源 适合蛋白质分析 无机MS中几种常见的离子源 感耦等离子体（Inductively Coupled Plasma，ICP）源 EI源 曾称为“电子轰击（Electron Impact，EI）”电离源 特点 “硬”电离 分子离子、碎片离子； 多用于一级MS 质谱图重复性好 API源 顾名思义，API是在大气压而非高（如EI）或低（如CI）真空环境中实现的一类电离技术 API源的出现，解决了色谱仪与质谱仪接口的难题，极大地推动了LC-MS的成熟 API源 主要包括以下3种类型 电喷雾电离（Electrospray Ionization，ESI）源 大气压化学电离（Atmospheric Pressure Chemical Ionization，APCI）源 大气压光电离（Atmospheric Pressure Photoionization， APPI）源 ESI源 SCIEX公司的ESI源 ESI源 Waters公司的ESI源（Z-Spray） ESI源 Agilent公司的ESI源 ESI的机理 电离过程大致可分成三个阶段（以ESI＋为例）： 第一阶段：使溶液分散成带电雾滴 强电场→液滴形成泰勒锥→瑞利稳定极限→锥喷流（Cone-Jet）→ 约1mm后就迅速膨胀为羽流（Plume），即多个带正电荷的直径为1～2μm的雾滴（高压静电＋气动辅助） ESI的机理 锥喷流的照片 ESI的机理 第二阶段是溶剂蒸发与雾