CN107164550-CN201710592593-一种检测心肌梗死的试剂及其应用.pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 107164550 A (43)申请公布日 2017.09.15 (21)申请号 201710592593.9 (22)申请日 2017.07.19 (71)申请人 北京泱深生物信息技术有限公司 地址 100080 北京市海淀区善缘街1号立方 庭大厦3103室 (72)发明人 李曙光　孙锦云　 (51)Int.Cl. C12Q 1/68(2006.01) 权利要求书1页 说明书7页 序列表1页 附图3页 (54)发明名称 一种检测心肌梗死的试剂及其应用 (57)摘要 本发明涉及一种检测心肌梗死的试剂及其 应用，更具体的涉及一种检测miR-520c的试剂及 其在制备诊断心肌梗死试剂中的应用。现有的心 肌梗死诊断生化指标如肌酸激酶、乳酸脱氢酶、 肌红蛋白等由于其特异性或敏感性等原因，在临 床应用中受到一些限制，本发明基于高通量测序 方法，获得与心肌梗死密切相关分子标志物miR- 520c。分子标志物联合现有的生化指标使它们互 为补充，弥补单一检测方法的某些不足，为临床 的精准诊断和治疗奠定基础。 A 0 5 5 4 6 1 7 0 1 N C CN 107164550 A 权　利　要　求　书 1/1页 1.一种检测心肌梗死的试剂，所述试剂检测miR-520c的表达水平。 2.根据权利要求1所述的试剂，其特征在于，试剂还检测miR-1274b的表达水平。 3.根据权利要求1所述的试剂，其特征在于，miR-520c的序列见序列表SEQ  ID NO  1； miR-1274b的序列见序列表SEQ  ID NO 2。 4.根据权利要求1所述的试剂，其特征在于，诊断心肌梗死试剂包括基于高通量测序方 法和/或基于定量PCR方法和/或基于探针杂交方法检测样本中miR-520c和/或miR-1274b。 5.根据权利要求1所述的试剂，其特征在于，采用northern杂交方法、miRNA表达谱芯 片、核酶保护分析技术、RAKE法、原位杂交、基于微球的流式细胞术检测样本中miR-520c和/ 或miR-1274b的转录。 6.根据权利要求1所述的试剂，其特征在于，样本为外周血。 7.根据权利要求1所述的试剂，其特征在于，miRNA为miR-520c的前体，前体序列为SEQ  ID NO 5。 8.根据权利要求1所述的试剂，其特征在于，基于定量PCR方法包括特异性扩增miR- 520c和/或miR-1274b的引物，优选的，特异性扩增miR-520c的引物序列为SEQ  ID NO 3，特 异性扩增miR-1274b的引物序列为SEQ  ID NO 4；基于探针杂交方法包括与miR-520c和/或 miR-1274b的核酸序列杂交的探针。 9.权利要求1-8所述的试剂在制备诊断心肌梗死试剂中的应用。 10.下调miR-520c和/或miR-1274b的转录和/或抑制miR-520c和/或miR-1274b的活性 的试剂在制备防治心肌梗死制剂中的应用优选的，采用反义寡核苷酸、antagomiRs、miRNA 海绵、miRNA Erasers、Target Masking和/或多靶点反义寡核苷酸的方法下调miR-520c和/ 或miR-1274b的转录和/或阻断miR-520c和/或miR-1274b的活性。 2