CN107034283-CN201710330363-一种胰腺癌药物耐受性的检测方法和试剂盒.pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 107034283 A (43)申请公布日 2017.08.11 (21)申请号 201710330363.5 (22)申请日 2017.05.11 (71)申请人 南京北恒生物科技有限公司 地址 210046 江苏省南京市栖霞区仙林街 道仙林大学城纬地路9号F7栋554室 (72)发明人 贺小宏　王延宾　袁鹏　王鑫　 张承武　李林　 (74)专利代理机构 南京众联专利代理有限公司 32206 代理人 吕书桁 (51)Int.Cl. C12Q 1/68(2006.01) 权利要求书1页 说明书7页 序列表2页 附图4页 (54)发明名称 一种胰腺癌药物耐受性的检测方法和试剂 盒 (57)摘要 本发明属于基因工程领域，特别涉及一种胰 腺癌药物耐受性的检测方法和试剂盒，miR-584、 miR-153、miR-188和miR-483在胰腺癌耐药组织 样本中相比于胰腺癌正常组织样本中显著高表 达，可作为胰腺癌药物耐受性筛选标志物，对临 床患者提供准确的临床用药指导；本发明的胰腺 癌药物耐受性miRNA检测试剂盒是以miR-584、 miR-153、miR-188和miR-483联合使用作为胰腺 癌药物耐受性检测指标，基于荧光实时定量PCR 的检测试剂盒；可快速方便、检测灵敏度、特异度 高、成本低，满足绝大多数胰腺癌药物耐受性的 A 检测需求，应用范围极广，经临床验证预测准确 3 率高。 8 2 4 3 0 7 0 1 N C CN 107034283 A 权　利　要　求　书 1/1页 1.一种胰腺癌药物耐受性的检测方法，其特征在于，miR-584、miR-153、miR-188、miR- 483联合使用，用做胰腺癌药物耐受性筛选标志物。 2.如权利要求1所述的胰腺癌药物耐受性的检测方法，其特征在于，所述方法采用RT- PCR反应体系和实时荧光定量PCR反应体系检测胰腺癌细胞中miR-584、miR-153、miR-188、 miR-483的表达量之和。 3.如权利要求1或2所述的检测方法在胰腺癌药物耐受性检测试剂盒中应用。 4.一种胰腺癌药物耐受性检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒包含检测如权利 要求1所述的胰腺癌药物耐受性筛选标志物的检测体系，所述检测体系包括RT-PCR反应体 系和实时荧光定量PCR反应体系。 5.如权利要求4所述的胰腺癌药物耐受性检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒的检测 体系的引物包括miRNA检测的RT-PCR特异性引物，荧光定量PCR的正向引物和反向通用引 物： 其中，U6miRNA为内参。 6.如权利要求4所述的胰腺癌药物耐受性检测试剂盒，其特征在于，用于配制所述实时 荧光定量PCR反应体系的试剂包括SYBRGreen混合液、ROX校正液，正向引物液、反向通用引 物液和纯水；用于配制所述RT-PCR反应体系的试剂包括RT-PCR特异性引物、多聚腺苷酸聚 合酶、反转录酶混合液、反转录缓冲液和无核酸酶纯水。 2 2 CN 107034283 A 说　明　书