小白鼠肝细胞线粒体超活染色.docVIP

科目 细胞生物学实验 姓名 *** 系年级 2011级生物基地 学号*** 日期 2013.05.09 同组者 *** 小白鼠肝细胞线粒体超活染色与观察 【实验目的】 1.学习和掌握细胞的超活染色技术； 2.观察小白鼠肝细胞内线粒体的形态和结构。B是毒性较小的碱性染料，可专一性地对线粒体进行超活染色，这是由于线粒体内的细胞色素氧化酶系的作用，使染料始终保持氧化状态(即有色状态)，呈蓝绿色；而线粒体周围的细胞质中，这些染料被还原为无色的色基(即无色状态)。 【实验材料】 1.试剂：Ringer液、詹纳斯绿B溶液。 2.器具：解剖盘、镊子、眼科剪、小烧杯、吸管、双凹片、载玻片、盖玻片、普 通光学显微镜，等。 3.材料：小白鼠。 【实验步骤】 1.用断头法处死小白鼠，置于解剖盘中，剪开腹腔，取小白鼠肝组织，选取边缘 较薄的肝组织0.5cm3，放入小烧杯中，用Ringer液冲洗去血污。 2.在干净的凹面载玻片的凹穴中, 滴加1/5000詹纳斯绿B溶液，再将肝组织块移 入染液中，注意不可将组织块完全淹没，要使组织块上面部分半露在染液外， 这样细胞内的线粒体酶系可充分得到氧化，易被染色。 当组织块边缘被染成蓝绿色即成(—般需染20～30min)。 3.吸去染液，用眼科剪将组织块着色部分剪下重置小烧杯中，滴加Ringer溶液 0.5ml