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鉴定板说明书升级版
鉴定板操作说明书
(升级版)
肠杆菌IDS-96 (SJ)
非发酵菌IDS-96 (SJ)
链球菌/肠球菌IDS-96(SJ)
葡萄球菌/微球菌IDS-96 (SJ)
真菌IDS-96 (SJ)
肠杆菌IDS-96测试板
使用说明书
【概述】
本测试板专供细菌学检验中,对肠杆菌科细菌进行鉴定和各种抗菌药物的敏感度测定。将被测菌加入测试板经孵育后,即可将属于肠杆菌科的22个属,以及非发酵菌中氧化酶阴性的细菌快速而准确地鉴定到种,同时判断被测菌对20余种抗生素的MIC,分析其耐药程度,打印出详细的检验报告。是国内迄今最完善而简便实用的细菌分析系统。
药敏部分则完全按NCCLS(2007)文件的规定执行。菌株测试与国外同类产品进行数百株菌种的平行比较符合率达95%左右。因此本产品具有较高的规范性和可靠性。
【试剂盒组成】
1.肠杆菌科IDS-96测试板 10块
2.肠杆菌稀释液(4ml/瓶) 10瓶
3.肠杆菌药敏培养液(10ml/瓶) 10瓶
4.简易操作流程 1份
5.辅助试剂(vp 试剂A 、vp试剂 B、靛基质试剂、苯丙氨酸试剂、无菌石蜡油、)
【生化试验操作方法】
1.所有的操作过程应避免杂菌污染。
2.使用本测试板的被测菌应符合以下三项要求:
●无特殊营养要求的革兰氏阴性杆菌;
●氧化酶试验阴性;
●18-24小时分离培养的单个纯菌落(或纯培养物)。
3.菌液制备:挑取纯培养单个菌落于肠杆菌稀释液(4ml)瓶内壁研磨呈细菌悬液(0.5麦氏单位可以参照标准比浊管,也可以使用本公司的浊度计)。
4.用连续移液器(配无菌移液头)吸取该菌液加入测试板A、B两排和C1—4的鉴定孔内(共计28孔),每孔100ul。
5.在A1-A7孔(GLU)、(H2S)、(URE)、(ORN)、(ARG)、(LYS)、(C)分别滴加石蜡油2滴。
【药敏试验操作方法】
1、自肠杆菌稀释液吸菌悬液100ul,加至肠杆菌药敏培养液内,混匀,继续加入测试板的其余各孔,(所有的药敏孔及生长对照孔C+),每孔100ul。
2、撕开不干胶的纸对齐贴于鉴定板,35-37℃孵育。
3、剩余的菌液及移液头浸入杀菌溶液内浸泡灭菌。
4、孵育过夜(18-24小时)后,先于A12孔(VP)滴加VP试剂A、B各1滴,20分钟后,再于A11孔(IND)滴加靛基质试剂一滴,数分钟后,于A10孔(PHE)滴加苯丙氨酸试剂一滴,立即判读结果。
【结果判读】
1. 将测试卡放进微生物自动分析仪读板,读板完毕后,传送到电脑,点击“判别”键后,即显示被测菌名称和各项药敏的分析结果,并打印报告单。详细操作请参照黑马微生物分析系统6.0中4.10的自动测试卡检测。
2. 具体操作详见黑马微生物分析系统《操作手册》。
肠杆菌IDS-96测试板示意图
【注意事项】
1.本测试板各孔底物系统在无菌条件下冷冻干燥,密封包装,临用时先置室温预温再在无菌操作下打开,板盖不可随意掀启,以防空气杂菌污染。
2.使用前请仔细阅读本说明书、微生物分析仪《操作手册》和分析仪软件中的“帮助”系统。
3.被测菌必须是新鲜的纯养物,严格避免从平皿上刮取两种或两种以上的菌落或用陈旧的培养物进行试验。
4.必须事先做好板外的鉴定试验,即氧化酶试验和革兰氏染色镜检(必要时还需观察动力),若未做,或做得不准确,板上的鉴定结果将可能出现根本性的错误。板外试验的方法和要求详见黑马微生物分析系统软件中的“帮助”栏。
5.沙门及志贺菌属的所有菌种,均应做血清凝集试验(玻片凝集)后,输入菌名发报告。
6.孵育48小时以后的反应结果不能作为判断的依据。
【贮存及效期】 2-8℃保存
【废弃培养物处理】 高压灭菌或焚烧后丢弃。
【贮存及效期】1年
附表A 反应结果判读标准
孔号
试验名称
结 果 阴性 阳性 A1 GLU葡萄糖发酵 紫色 黄色 A2 H2S硫化氢产生 土黄色 黑色 A3 URE尿素酶 黄色/橙色 红色 A4 ORN鸟氨酸脱羧酶 黄色 红色 A5 ARG精氨酸水解酶 黄色 红色 A6 LYS赖氨酸脱羧酶 黄色 红色或橙红色 A7 C氨基酸对照 黄色或橙色 A8 CIT枸橼酸盐利用 黄色或黄绿色 蓝色 A9 MLT丙二酸盐利用 黄色或黄绿色 蓝色 A10 PHE苯丙氨酸脱氨酶 加试剂后黄色 加试剂后深褐色 A11 IND靛基质产生 加试剂后黄色 加试剂后红色 A12 VP 加试剂后黄褐色 加试剂后暗红色(20分钟) B1 ARA阿拉伯糖发酵 紫色 黄色 B
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