tl2_DNA复制.ppt

二、双向复制 (Bidirectional Replication) 三、半不连续复制semi-discontinuous replication 原核生物基因是环状 DNA，双向复制的复制片段在复制的终止点 (ter) 处汇合。 端粒酶(telomerase) 线性DNA在复制完成后，其末端由于引物RNA的水解而可能出现缩短。故需要在端粒酶（telomerase）的催化下，进行延长反应。 端粒酶(telomerase) 端粒酶是一种RNA-蛋白质复合体，它可以其RNA为模板，通过逆转录过程对末端DNA链进行延长。 E.coli复制起始点 oriC GATTNTTTATTT ··· GATCTNTTNTATT ··· GATCTCTTATTAG ··· 1 13 17 29 32 44 ···TGTGGATTA-‖-TTATACACA-‖-TTTGGATAA-‖-TTATCCACA 58 66 166 174 201 209 237 245 串联重复序列 反向重复序列 5? 3? 5? 3? 1. DNA 解链 复制起始的解链需要多种蛋白质(主要由DnaA, B,C)参与。 这些蛋白质与复制起始点的特有序列结合，促使其邻近的DNA解链。 DnaA 蛋白 作用：辨认复制起始点 ? 结合oriC的4个9 bp反向重复序列形成复制起始复合物。 ? 作用于oriC的3个13bp正向重复序列，DNA在这3个位点 解链，形成开放型复合物（opencomplex）。 DnaB 蛋白 作用：解开DNA双链 ? 5 ? 3 ? 解旋酶作用产生两条复制模板链 ? 激活引发酶 DnaG 蛋白 ? DnaB 蛋白与引发(物)酶结合，形成引发体 DnaC 蛋白 作用：运送和协同 DnaB Dna A Dna B、DnaC DNA拓扑异构酶 引物酶 SSB 3? 5? 3? 5? 2. 引发体和引物 含有解螺旋酶、引物酶和 DNA复制起始区域的复合结构称为引发体。 ? 是短链RNA。 ? 长度一般为11~12个核苷酸 ? 合成方向是 5 ?→3 ? 方向。 ? 提供的 3 ?-OH，可在 DNA-polⅢ 催化下，利用 dNTP 生成磷酸二酯键。 引物 复制的延长指在 DNA-pol 催化下，dNTP 以 dNMP 的方式逐个加入引物或延长中的子链上，其化学本质是磷酸二酯键的不断生成。 （二）复制的延长 在复制叉同时合成前导链和后随链 ori ter E.coli 82 32 ori ter SV40 50 0 （三）终止阶段 Simian virus 40 5? 5? 5? RNA酶 OH P 5? DNA-pol Ⅰ dNTP 5? 5? P ATP ADP+Pi 5? 5? DNA连接酶 随从链上不连续性片段的连接 ? 细胞能否分裂，决定于进入S期及M期这两个关键点。G1→S及G2→M的调节，与蛋白激酶活性有关。 ? 蛋白激酶通过磷酸化激活或抑制各种复制因子而实施调控作用。 二、真核生物的DNA生物合成 哺乳动物的 细胞周期 DNA合成期 端粒(telomere) 指真核生物染色体线性DNA分子 末端的结构,通常膨大成粒状。 结构特点： ? 由末端DNA序列和蛋白质构成。 ? 末端DNA序列是多次重复的富含G、T碱基的短序列。 功能： ? 维持染色体的稳定性 ? 维持DNA复制的完整性 TTTTGGGGTTTTGGGG… DNA-pol Ⅰ DNA-pol Ⅱ DNA-pol Ⅲ DNA聚合酶的种类 原核生物 真核生物 DNA-pol ? DNA-pol ? DNA-pol ? DNA-pol ? DNA-pol ? 分子量（kD ) 分子数/细胞 多亚基不对称二聚体 109 120 250 有 无 无 5→3 核酸 外切酶活性 DNA-pol I DNA-pol II DNA-pol III 20 ？ ？ 组成 单肽链 400 可能 基因突变后 的致死性 可能 不可能 （一）原核生物的 DNA 聚合酶 单肽链 首先被发现，