食品中甜蜜素的研究.pptVIP

人人都在质疑，你敢放心食用吗？？ 2、仪器和试剂 2.1仪器 (1) TU-1900双光束紫外一可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司); (2) MVS-1漩涡混合器(北京北德工贸有限公司); (3) BS110S电子天平(Sartorius公司); (4) KH-100B型超声波清洗器(昆山禾创超声仪器有限公司); (5) TGL-16G离心沉淀器(上海安亭科学仪器厂)。 2.2 试剂 (1)盐酸，分析纯(沈阳化学试剂厂); (2)碘化钾，分析纯(沈阳市医药公司化玻站试剂分装厂); (3)硫酸，分析纯(辽宁省兴城市红星化工厂); (4)磷酸，分析纯(沈阳化学试剂厂); (5)亚硝酸钠，分析纯(沈阳市试剂一厂); (6)甜蜜素，标准物质(国家标准物质研究中心); (7)苯甲酸，分析纯(沈阳市新西试剂厂); (8)山梨酸，标准物质(国家标准物质研究中心); (9)糖精钠，标准物质(国家标准物质研究中心); (10)蔗糖标准物质，分析纯(天津科密欧化学试剂开发中心); (11)葡萄糖标准物质，分析纯(天津科密欧化学试剂开发中心); (12)咖啡因，分析纯(Lancaste:公司); (13)柠檬酸，分析纯(东北制药总厂一分厂)。 2.3 试剂的配制 (1)1000ug/ml甜蜜素标准储备液的配制: 准确称取0.1000 g甜蜜素，加少量去离子水溶解后转移至100 ML容量瓶中，定容至刻度，得到1000 A.g/mL甜蜜素标准储备液。 (2) 2.5 mol/L盐酸溶液的配制: 取浓盐酸52.1 mL于250 mL容量瓶中，用去离子水定容至刻度，得到2.5 mol/L盐酸溶液。 (3) 0.05 mol/L碘化钾溶液的配制: 称取2.075 g碘化钾固体，用去离子水溶解后转移至250 mL容量瓶中，定容至刻度，得到0.05 mollL碘化钾溶液，避光放置或保存于棕色瓶中。 (4) 0.2 mol/L亚硝酸钠的配制: 称取0.690 g亚硝酸钠固体，用去离子水溶解后转移至50 mL容量瓶中，定容至刻度，得到0.2mol/L亚硝酸钠溶液，避光放置或保存于棕色瓶中。 (5) 2.0 mmollL亚硝酸钠的配制: 吸取0.2 mol/L亚硝酸钠1.0 ML于100 ML容量瓶中，去离子水定容至刻度，临用时新配。 (6) Crattz试剂I:亚铁氰化钾106 g/L，称取10.6 g亚铁氰化钾，用水溶解并稀释至100 ML. (7) Crattz试剂II:乙酸锌220泌，称取22 g乙酸锌，用水溶解并稀释至100 ML. 3.试验方法 3.1 预处理 (1)汽水等碳酸型饮料 称取5.00 -10.00 g样品于50.00 mL容量瓶中，加入少量流动相，超声脱气10 min,加入Crattz试剂I、Crattz试剂if各0.5 mL，用流动相定容至刻度，混匀后放置15 min。取上清液约5 mL在4000 r/min下离心10 min，上清液过0.45um滤膜。 (2)乳饮料、醋 称取约5.00 g样品于50.00 mL容量瓶中，加入少量流动相，加入Crattz试剂I、Crattz试剂II各5.00 mL，用流动相定容至刻度，混匀，超声10 min后放置15 min。取上清液约5 mL在4000 r/min下离心10 min，上清液过0.45 um滤膜。 (3)固体 将固体样品均质后称取约2.00 g，操作同(2). 3.2 操作步骤 准确移取2.5 mol/L HCl溶液1.0 ML于50 mL比色管中，移取样品滤液5.0 mL，加入2.0 mmol/L的亚硝酸钠溶液1.6 mL，用去离子水洗比色管口，漩涡1 min后于避光处 放置20 min后，迅速加入0.05 mol/L KI溶液2.0 mL，用去离子水稀释至刻度，摇匀后，于暗处放置10 min。 以去离子水作参比液，用10 mm比色皿于波长350 nm处测定溶液的吸光度。 3.3 标准曲线的绘制 移取2.5 mol/L的盐酸溶液1.0 mL于8支50 mL比色管中，分别准确加入1000.00ug/mL的甜蜜素标准溶液0.06, 0.10, 0.20, 0.30, 0.40, 0.50, 0.60, 0.70 mL，加入2.0mmol/L亚硝酸钠溶液1.6 mL,漩涡混合1 min，暗处反应20 min后，加入0.05 mol/LKI溶液2.00 mL定容后，暗处放置10 min，得到浓度分别为1.2, 2.0, 4.0, 6.0, 8.0, 10.0,12.0, 14.0 pg/mL的甜蜜素标准系列，并测定相应吸光度值A。不加甜蜜素，按照上述操作步骤，