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实 验 内 容 离 体 蛙 心 灌 流 实 验 目 的 学习离体蛙心灌流的方法 观察Na+、K+、Ca2+以及肾上腺素、心得安等对离体心脏活动的影响 实 验 原 理 心脏的活动具有自动节律性。动物的心脏离体后,用理化特性类似于其血浆的替代液(任氏液)灌流后,在一定的时间内,仍能有节律的收缩和舒张,改变灌流液的成分,则可引起心脏活动的改变。 实 验 原 理 心脏受交感神经和迷走神经的支配。交感神经兴奋时,其末梢释放递质---去甲肾上腺素(NA),作用于心肌细胞上的β受体,使心肌收缩力增强;迷走神经兴奋时,其末梢释放递质—乙酰胆碱(Ach),作用于心肌细胞膜上的M受体,对心肌细胞起抑制作用,使心肌的自律性降低。用受体阻断剂(心得安)阻断受体,则相应的递质不能发挥作用。 实 验 用 品 蛙心套管、常用手术器械、蛙心夹、蛙板、棉线、毁髓针、任氏液、滴管、烧杯、5%NaCl、2%CaC12、1%KCl、0.01%心得安、0.01%肾上腺素、计算机和机械-电换能器、铁支架、双凹夹。 蟾蜍或蛙, 实 验 动物 方 法 与 步 骤 一. 离体蛙心的制备(斯氏蛙心插管法) 取一只个体较大的蟾蜍,用毁髓针双毁脊髓和脑,仰卧固定于蛙板上; 暴露心脏:左手持镊提起胸骨后端的皮肤,右手持剪将皮肤剪一小口,然后将剪刀由开口处伸入皮下,朝向两侧下颌角方向剪开皮肤,并将皮肤掀向头端。用镊子提起胸骨后方的腹肌,在腹肌上剪一小口,将粗剪刀紧贴胸壁伸入胸腔(避免损伤下面的心脏和血管),沿皮肤切口方向剪开肌肉,剪断左右乌喙骨和锁骨,使创口成一个倒三角形。左手持眼科镊,小心提起心包膜,右手用眼科剪剪开心包膜,将心包膜剥离,使心脏完全暴露。用眼科剪小心剪去左右主动脉干周围的心包膜和系膜。 在左主动脉下穿一线,距动脉圆锥5mm处结扎。再在左、右两主动脉干下穿一线,打一活节备用。左手提起左动脉干上的结扎线,右手用眼科剪在动脉圆锥前端沿向心方向剪一斜口,将少量任氏液加入斯氏蛙心套管中,立即用右手食指堵塞住套管上口,然后将套管尖端由左主动脉上的剪口插入动脉圆锥。当套管尖端到达动脉圆锥基部时,应将套管稍稍后退,使尖端向动脉圆锥部后方及心尖方向推进,经主动脉瓣插入心室腔内,不可插入太深,以免插破心室壁或心室堵住套管下口。 此时可见套管中液面随心脏搏动而上下移动。用滴管吸去套管中的血液,补充新鲜的任氏液,如此反复几次,使任氏液完全替代血液,若套管插入心室未见液面上下移动,则可能是凝血小块堵塞了套管下口。提起备用线,将左主动脉连同插入的套管扎紧,再将结扎线固定在套管的小钩上。剪断结扎线上方的血管,轻轻提起套管和心脏,在心脏的下方绕一线,将左右肺静脉及前后腔静脉一起结扎(注意切勿损坏静脉窦),于结扎线下方剪去所有牵连的组织,将心脏摘出。保持套管内液面恒定高度,即灌流液充满套管三分之一,即可进行实验。 * *
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