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蛙的系列实验 动物学教研室 顾 勇 实验目的 1.学习坐骨神经——腓肠肌标本的制备技术。 2.了解蛙微循环区各类血管血流特点及某些药物对血管舒缩活动的影响。 3.了解脊髓反射和反射弧的组成及反射弧各部位的作用。 4.了解迷路在维持动物姿势平衡和正常运动中的作用。 5.初步培养学生合理利用实验材料进行综合实验的能力。 1.蛙类心跳起源的分析。 2.蛙类微循环的观察。 3.脊髓反射和反射弧的分析。 4.蛙一侧迷路破坏的效应。 5.蛙类坐骨神经-腓肠肌标本的制备。 实验内容(供选择) 材料与用品 (一)材料 活蛙(限1人1只蛙)。 (二)用品 显微镜、解剖器具、毁髓针、玻璃针、蜡盘、有孔橡皮蛙板、铁支架、细铁丝钩或蛙嘴夹、电炉、温度计、秒表、注射器、小烧杯、大烧杯、滴管、培养皿、大头针、纱布、棉球、细线、小滤纸片。0.65%生理盐水、0.01 %去甲肾上腺素、0.01%组织胺、20%氨基甲酸乙酯、1%可卡因、任氏液、0.5%、1%和2%硫酸溶液、瑞氏染液、蒸馏水、冰水、水。 操作与观察 (具体实验项目及其顺序由学生自行选择和安排) 1.左手握蛙,背部向上,用食指下压其头部前端,使头前俯,中指抵住其胸部,拇指按其背部,使头与脊柱相连处凸起。右手持毁髓针自两眼之间沿中线向后端触划,当触到一凹陷处即枕骨后凹。 2.将毁髓针由凹陷处垂直刺入,再将针尖从枕骨大孔向前刺入颅腔,并在颅腔内搅动,捣毁脑组织。如针确在颅腔内,则可感到针触及颅骨(图16-1)。 3.将针退回至枕骨大孔,然后针尖转向后方与脊柱平行插入椎管,一边伸入,一边旋转毁髓针以毁髓。当蛙四肢僵直而后又松软下垂时,即表明脑和脊髓完全破坏。如动物仍表现四肢肌肉紧张或活动自如,则必须重新毁髓。 4.拔出毁髓针,用一小干棉球将针孔堵住,以止其出血。 (一)双毁髓 (二)心搏起源的分析 1.暴露心脏 (1)将双毁髓蛙背位置蜡盘中,展开四肢,用大头针于腕部和跄部钉人,以将蛙固定在蜡盘中。**为什么用双毁髓蛙进行心搏起源的分析? (2)左手持镊提起胸骨后方腹部皮肤,右手持剪剪开一小口,然后将剪刀由切口处伸入皮下,向左右两侧锁骨的外侧方向剪开皮肤,并向头端掀开皮肤。 (3)再用镊子提起胸骨后方的腹肌,用金冠剪在腹肌上剪一小口后,沿皮肤切口方向剪开胸壁, **剪时剪刀尖紧贴胸壁,以免损伤内脏和血管,剪断左右乌喙骨和锁骨,剪去胸壁,使创口成1个倒三角形,此时可见到心脏在围心腔内搏动。 (4)左手持眼科镊提起半透明围心膜,右手用眼科剪剪开围心膜,暴露心脏。 **以下实验中应不时用任氏液保持心脏湿润。为什么? 2.观察心脏的构造(图16-2) 参见本实验“蛙的外形及内部构造”中“心脏及其周围血管”部分。 3.观察心搏过程 观察静脉窦、心房和心室收缩的顺序,并用秒表记录心搏频率。注意心室收缩时容积和颜色的变化。 4.不同温度刺激蛙心各部位 用盛有约40 。C温水的小试管底部分别接触心房、心室和静脉窦1 min,重复3次并记录每次温度刺激时心脏各部位的搏动频率。换用盛冰水的小试管,重复上述试验并记录。 **小试管底部接触所刺激部位时,不能接触到心脏其他部位,以免影响实验结果。根据实验结果,分析心脏何部位的搏动为心搏的起源。 5.斯氏结扎 (1)用眼科镊在左右动脉干下穿一线备用,将心尖翻向头端,暴露心脏背面,然后将放置在动脉干下的那条线在窦房沟处作一结扎(图16-3),即为斯氏第1结扎(图16-2A):观察心脏各部分搏动节律的变化,可见心房、心室立即停止搏动,而静脉窦仍继续搏动,用秒表记录静脉窦搏动频率。待心房和心室恢复搏动后,分别记录它们的搏动频率。 (2)然后在冠状沟处穿线做第2结扎,即斯氏第2结扎(图16-2B)。这时心房和静脉窦仍继续搏动,心室则停止搏动。待心室恢复搏动后,记录心脏各部位的搏动频率。 **根据试验结果,分析蛙心脏不同部位节律性的高低,正常情况下心脏节律活动的顺序。 (四)蛙类一侧迷路破坏的效应 1.将蛙放在桌面上和水盆中,观察其正常的姿势和运动。 2.破坏蛙的一侧迷路并观察其效应。 (1)用纱布包住蛙躯干部,使其腹面向上握于左手中,翻开下颌用左手拇指压住。右手持手术刀在颅底口腔粘膜作一横切口,分开粘膜,即可看到“十”字形的副蝶骨。迷路即位于副蝶骨横突的左右两旁(图16-5)。 (2)用手术刀削去一侧横突的骨质,可看到粟粒大小的小白点,此处即是内耳囊。将毁髓针刺人内耳囊2-3mm,勿刺得太深,以免损伤中枢

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