(精编)【医学教学课件】基因工程菌与固定化细胞教学课件.ppt

第十一章 基因工程菌与固定化细胞;第一节 基因工程菌的构建与培养;一、工程菌简介;蛋白名称 用途;3、生产生物小分子;4、生产生物多聚体;二、工具酶、载体与宿主;一）基因工程工具酶;Hind III的识别序列：;HpaI的识别序列：;2、DNA连接酶（DNA ligase）;3、其它;二）克隆载体;基因工程的常用载体：;1、质粒克隆载体;;;;;2、λ噬菌体克隆载体;;与溶原性相关的基因可以被外源DNA取代而不影响λ噬菌体的感染、复制和裂解宿主细胞的能力。; 经过体外基因操作和包装后形成重组噬菌体，可以通过正常的感染途径进入宿主细胞；重组噬菌体DNA也可不经过体外包装而直接通过转染（转化）方式进入宿主细胞.;质粒和噬菌体载体都可用于 构建基因文库； 但后者更有优势： 容纳的外源DNA片段较大； 以感染途径进入宿主细胞的 效率比转化高； ;;3、柯斯质粒载体;特点：;;4、M13噬菌体载体;? M13克隆载体是对野生型M13进行改造后建成，其特点是虽然克隆外源DNA的能力较小，一般只适于克隆300～400bp的外源DNA片段，但特别适合用于制备克隆基因的单链DNA。;;5、噬菌粒载体;噬菌粒载体;6、真核生物的克隆载体;7、人工染色体;三）基因工程的宿主;2、常用的基因工程宿主;三、工程菌构建过程简介;复制