实验三一次给药皮肤刺激实验.doc

实验 一次给药皮肤刺激实验 一、实验目的 。 二、实验器材 记号笔1支每组：长镊子1支、医用手套2双、、注射器（1 mL）1支、烧杯（50 mL）1个、cm×1.5 cm）8张。 三、实验内容与步骤 cm×2 cm。注意需将皮肤绷紧，把剪刀贴紧皮肤剪，但不可用手提起被毛，以免剪破皮肤；依次剪毛，不要乱剪；剪下来的被毛集中在一个装水的烧杯内，勿遗留在和操作台周围。 3、破损皮肤的制备：给药前24 h，用75%酒精消毒小鼠裸露皮肤部位，用消毒针头在剃毛部位做“井”字状划划痕，划破皮肤，以有组织液和血液渗出为度。 3、染毒：吸取1 mL受试物滴于两层灭菌纱布（1.5 cm×1.5 cm）上，将浸有受试物的纱布覆盖在左侧裸露皮肤区域，用透明胶布固定，右侧皮肤以3%吐温80为对照。 4、观察：一次给药4 h后，以温水洗去残留受试物，观察1 h，24 h、48 h、72 h涂抹部位的红斑和水肿等反应。按表1进行皮肤反应评分，以受试动物积分的平均值进行综合评价，将观察结果填入表3中。 5、结果判定：根据24、48和72 h各观察时点最高积分均值，按表2判定皮肤刺激强度。 6、实验分组：见表4 四、注意事项 在实验操作过程中，注意安全，以免被小鼠咬伤，防止小鼠丢失；实验使用的有毒化学药品妥善处理；做好实验记录。 皮肤刺激反应评分 皮肤反应 积 分 红斑和焦痂形成 无红斑 0 轻微红斑（勉强可见） 1 明显红斑 2 中度~重度红斑 3 严重红斑（紫红色）至轻微焦痂形成 4 水肿形成 无水肿 0 轻微水肿（勉强可见） 1 轻度水肿（皮肤隆起轮廓清楚） 2 中度水肿（皮肤隆起约1mm） 3 重度水肿（皮肤隆起超过1mm，范围扩大） 4 最高积分 8 表3 皮肤刺激强度分级 积分均值 强 度 0 ~ ＜ 0.5 无刺激性 0.5 ~ ＜ 2.0 轻刺激性 2.0 ~ ＜ 6.0 中刺激性 6.0 ~ 8.0 强刺激性 表 3 桉叶油素对小鼠急性皮肤刺激性试验结果 动物编号 1 h 24 h 48 h 72h 样品 对照 样品 对照 样品 对照 样品 对照 红斑 水肿 总分 红斑 水肿 总分 红斑 水肿 总分 红斑 水肿 总分 红斑 水肿 总分 红斑 水肿 总 分 红斑 水肿 总 分 红斑 水肿 总 分 1 2 3 4 总积分均值 刺激强度分级 表4 实验分组情况 组别 Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ Ⅵ 完整皮肤 100% 50% 25% 100% 50% 25% 完整皮肤 100% 50% 25% 100% 50% 25% 破损皮肤 100% 50% 25% 100% 50% 25% 破损皮肤 100% 50% 25% 100% 50% 25%