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苏州大学医学部 人解与组胚系 苏州大学医学部 人解与组胚系 苏州大学医学部人解与组胚系 组 织 学 绪 论 Introduction of Histology 第 1 章 本 章 重 点 了解组织学研究的常用技术 了解石蜡切片的一般制作方法 掌握HE染色步骤，嗜酸性、嗜碱性的含义 石蜡切片制作过程 取材 石蜡切片制作过程 取材 固定 石蜡切片制作过程 取材 固定 水洗 石蜡切片制作过程 取材 固定 水洗 脱水 石蜡切片制作过程 取材 固定 水洗 脱水 透明 石蜡切片制作过程 取材 固定 水洗 脱水 透明 包埋 石蜡切片制作过程 取材 固定 水洗 脱水 透明 包埋 切片 石蜡切片制作过程 取材 固定 水洗 脱水 染色 透明 包埋 切片 石蜡切片制作过程 取材 固定 水洗 脱水 染色 透明 包埋 切片 封固 第一章，组织学绪论 * * 本章要求了解组织学研究的常用技术，了解石蜡切片的一般制作方法，特别是要掌握HE染色步骤以及嗜酸性、嗜碱性的含义 * 下面介绍石蜡切片的制作过程： 首先是取材。 取材要求组织块应尽早固定。 组织块大小一般为1.0×1.0×0.3cm，若组织块太厚，则影响固定。 * 第二步，固定。 固定的目的是防止组织自溶及细菌性腐败，并使柔软的组织适当硬化。 组织取出后，立即放入固定液，常用固定液为乙醇或甲醛。 固定时间以组织块大小、固定液性质而定，一般为室温12-24小时。 注意，所用固定剂的量为所取组织体积的5-10倍，足以完全覆盖所取的组织。 * 第三步，水洗。 水洗的目的是清除残留的固定液，以免影响染色。 用流水冲洗， 水洗时间与固定时间相似，一般为12-24h。 * 第四步，脱水 脱水的目的是将组织中水分除去，以便透明剂和石蜡的渗入。 常用的脱水剂是酒精。 脱水程序为：50%→60%→70%→80%→90%→95%→无水酒精（1）→无水酒精（2），在每级酒精中停留时间为6-12小时。 浓度逐渐增高是为避免组织块急剧收缩。 * 第五步，透明 透明的目的是增加组织的透光度，并以透明剂置换出酒精，使石蜡容易浸入组织。 常用的透明剂是二甲苯。 先将组织块置于无水酒精与二甲苯混合液中浸泡30分钟至2小时，然后将组织块移至二甲苯中浸泡30分钟至1小时。 * 第六步，包埋。 包埋的目的是提高组织块硬度。 常用的包埋剂是石蜡。 将组织块置于熔化的石蜡中，渗透1至1.5小时，然后再放置在包埋框中。 * 第七步，切片 切片厚度一般为5至10μm。 * 第八步，染色 染色的目的是使组织着色，便于观察。 染色剂多种多样，常用的染色剂是苏木素和伊红, 称为HE染色。 * 最后，将组织封固。 封固的目的是使切片能较长时间保存。 常用的封固剂是树胶。 封固方法是在染色的组织上滴加一滴树胶，并盖上盖玻片。 苏州大学医学部 人解与组胚系 苏州大学医学部 人解与组胚系 第一章，组织学绪论 * * 本章要求了解组织学研究的常用技术，了解石蜡切片的一般制作方法，特别是要掌握HE染色步骤以及嗜酸性、嗜碱性的含义 * 下面介绍石蜡切片的制作过程： 首先是取材。 取材要求组织块应尽早固定。 组织块大小一般为1.0×1.0×0.3cm，若组织块太厚，则影响固定。 * 第二步，固定。 固定的目的是防止组织自溶及细菌性腐败，并使柔软的组织适当硬化。 组织取出后，立即放入固定液，常用固定液为乙醇或甲醛。 固定时间以组织块大小、固定液性质而定，一般为室温12-24小时。 注意，所用固定剂的量为所取组织体积的5-10倍，足以完全覆盖所取的组织。 * 第三步，水洗。 水洗的目的是清除残留的固定液，以免影响染色。 用流水冲洗， 水洗时间与固定时间相似，一般为12-24h。 * 第四步，脱水 脱水的目的是将组织中水分除去，以便透明剂和石蜡的渗入。 常用的脱水剂是酒精。 脱水程序为：50%→60%→70%→80%→90%→95%→无水酒精（1）→无水酒精（2），在每级酒精中停留时间为6-12小时。 浓度逐渐增高是为避免组织块急剧收缩。 * 第五步，透明 透明的目的是增加组织的透光度，并以透明剂置换出酒精，使石蜡容易浸入组织。 常用的透明剂是二甲苯。 先将组织块置于无水酒精与二甲苯混合液中浸泡30分钟至2小时，然后将组织块移至二甲苯中浸泡30分钟至1小时。 * 第六步，包埋。 包埋的目的是提高组织块硬度。 常用的包埋剂是石蜡。 将组织块置于熔化的石蜡中，渗透1至1.5小时，然后再放置在包埋框中。 * 第七步，切片 切片厚度一般为5至10μm。 * 第八步，染色 染色的目的是使组织着色，便于观察。 染色剂多种多样，常用的染色剂是苏木素和伊红, 称为HE染色。