表达HPV16E6和E7蛋白的非复制型重组痘苗病毒的构建.pdfVIP

第 卷 第 期 病 毒 学 报 18 3 Vol . 18 No. 3 年 月 2 0 0 2 9 C~INESE JOURNAL OF VIROLOGY Se t . 2 0 0 2 p 表达 和 蛋白的非复制型重组痘苗病毒的构建 HPvl6E6 E7 骆卫锋，韩立群，任皎，田厚文，陆振华，谷淑燕，阮力 （中国疾病预防控制中心 病毒病预防控制所，北京 100052 ） 摘要：为研制~PV16 的治疗性疫苗，首先将表达质粒pJSA1175 与非复制型痘苗病毒NTVJTK + 进行同源重组，构 建了痘苗重组病毒NTVJLac。再将表达质粒pJSDME6E7R 与NTVJLac 进行同源重组，构建了表达~PV16 E6 和 E7 蛋白的非复制型重组痘苗病毒NTVJmE6E7 ，并对获得的重组病毒进行了鉴定。Southern 杂交显示，重组痘苗 病毒 基因组中有 和 基因插入。该重组病毒在人源细胞中不复制。 显示，重组病 NTVJmE6E7 E6 E7 Western blot 毒在人源 - 细胞中能表达 和 蛋白。非复制型重组痘苗病毒 可作为 相关肿瘤及 TK 143 E6 E7 NTVJmE6E7 ~PV16 其癌前病变免疫治疗的实验性疫苗株。 关键词：乳头瘤病毒；宫颈肿瘤；痘苗病毒；疫苗；免疫治疗 中图分类号： ； 文献标识码： 文章编号： （ ） R373 .9 R730 .51 A 1000 - 8721 2002 03 - 0217 - 05 人乳头瘤病毒（ ， ）是 疫，是肿瘤疫苗研制的重要策略。痘苗病毒表达的 human a illomavirus ~PV p p 一类具有严格宿主范围和嗜组织特异性的DNA 病 细胞内抗原，可以有效地诱导特异性CTLs 的产生。 毒，主要感染人的皮肤或粘膜上皮细胞，引起感染部 这些特点使痘苗病毒成为肿瘤疫苗的合适载体。但 位发生良性和恶性病变。高危~PV 的感染与宫颈 是痘苗病毒载体接种人体后可产生较为严重的局部 癌的发生有十分密切的关系，约50 % 的宫颈癌的发 反应，免疫缺损个体可能发生严重的并发症。我室 ［］ 生与 1 通过去除痘苗病毒天坛株病毒基因组中一些涉及病 感染有关 。 的 和 蛋 ~PV16 ~PV16 E6 E7 白在大多数~PV16 相关宫颈癌及其癌前病变中可 毒毒力基因和宿主范围相关基因，成功地构建出高 ［］ 以持续表达，而在正常组织中并不存在，这两种蛋白 度减毒的非复制型痘苗病毒载体8