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腺相关病毒载体介导siRNA抑制HBV
表达和复制的研究
李琴山1。田硕2
(1贵阳医学院检验系，贵阳550004；2北京协和医学院医学分子生物学国家重点实验室)
摘要：目的构建能抑制HBVm
的复制。结论成功制备出rAAV．shRNA．GFP病毒，其能够抑制HBV的表达和复制。
关键词：腺相关病毒2；RNA干扰；正嗜肝DNA病毒属；基因疗法
doi：10．3969／j．issn．1002-266X．2013．37．004
中图分类号：R39 文献标志码：A 文章编号：1002-266X(2013)37-0012-04
Inhibitioneffectofadeno-associatedvirusvectormediatedsiRNAonthe
replication
and of Bvirus
expressionhepatitis
L／Oin—shanl．孔MⅣShUO
(1 Medical 550004，China)
Guiyang University，Guiyang
To forsiRNA
constructtherecombinantadeno-associated
Abstract：Objective virus(rAAV)vectorstargetinghep-
atitisB andtoobservetheinhibitiveeffecton and and ofHBVin
virus(HBV)mRNA HBsAgHbeAgexpressionreplication
vitro．MethodsThe Wasconstructedmolecular
biological
pAAV-shRNA—GFPexpressingplasmid by techniques．This
combinedwith and weretransfectedintohuman 293Tcells Li--
plasmid pAAV··RC pHelper embryonickidney using
2000．TherAAV-shRNA-GFPWas and Wasusedtoinfect 2．2．
pofecLamineTM packaged，amplifiedpurified，which HepG
15ceils．The effectofthisrecombinantonHBVWas ELISAandfluorescence RCR．Re-
inhibitory analyzedby quantitative
Theresultofrestriction and showedthattherecombinantadeno-associatedvirusvector
suits enzymedigestionsequencing
the ceilswereinfected rAAV-
was constructed．After
successfully HepG2．2．15
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