选择复制性腺病毒对人黑色素瘤细胞的特异性杀伤作用.pdfVIP

型监查垫塑生2旦筮婪鲞筮5塑坐!』塑生，娅塑血1 2哑，．№l塾坠! 基础研究 选择复制性腺病毒对人黑色素瘤细胞的 特异性杀伤作用 忍B 尸I 谢庆军陆应麟陈泽建张金强陈惠华凌贤龙吕品杜芝燕徐元基 【摘要】 目的构建靶向人黑色素瘤的选择复制性腺病毒，观察其对人黑色素瘤细胞的特异性 杀防作用。方法以PcR克隆的方法分别获得腺病毒El区、鼠酪氨酸酶启动子和增强子DNA片段； 用基因重组的方法构建靶向人黑色素瘤的选择复制性腺病毒的穿梭载体；用同源重组的方法获得靶 向人黑色素瘤的选择复制性腺病毒AdIlepEl；以低剂量Adh印E1分别攻击人黑色素瘤细胞系sK_Md—l 和人肝细胞癌细胞系H。pG2，观察细胞形态变化及汁箅存活细胞数；用RT_PCR检测E1A的表达，以证 实AdIlepEl的特异性复制。结果 终PCR证实，获得了靶向人黑色素瘤的选择复制性腺病毒 AdhepEl，人黑色素瘸细胞系sK_Mel—l对A【】}IepEl的裂解杀伤敏感，而人Ⅲ：细胞癌细胞系HepG2则不 敏感oR1：PcR的结果提示，AdkpEl在人黑色素瘤细胞中可特异地复制。结论Adhe陋l对人黑色 素瘤细胞具有良好的靶向性。 【主题词J黑色素瘤；腺病毒；基因治疗 11Ie spedfic k嘶哩时hLm髓∞T啦laI籼odlsby吗^妇吐帅刚ectIve鲥∞丽nⅡ J阿∞管^m，Ⅱ，协肾 ‰，CHEN z}#帆，zH蚋GJ靠q湎嘻，cHENH罅‰，u^cx洒一堍，m№。Duz珏，吼，xUYq吼一# 翩豇姚矿胁面埘edi耐＆汹倒，4c。d佣y旷膨缸o，y肺删＆缸删，成驷孵砌口渤．0hm ows阳H幽珥Ⅱu如吖：￡盯H，时￡虮 【Abs岍IctJ ％constnkt obd删ve q“c撕帆seIec血e“肿vinB^dhepEIh唧明IIIel蛐0nm t蝉脚IIg 0f vitIo huⅡmnr嘣aIlomcellsin MetI-0dsAder州jmsEl “oI啪“e沁spec证c蚓li“g re面叫，L|-em吲ne andenhancer1)NA P(：R shuide t)懈inasepI啪mter s8quenc鹧were by ac(111ir甜陀sp。c“velycIoniTIg．TIlepI嘲md adef，ov扫us ca嘞‘蜡h眦nan眦lammaw西c0咄h们刚by删A陀cor幽衄t【on．fkpljcadon_ of坤PKe砒ion_d“ye selec6veadeno“nB AdhepElw勰目ene珀todh}删llcdo自ollsndm虹血0【1．TI靶hIm瑚mel聊rⅡceUlineSK-Md．1 and can；110lnaceⅡHne wem lowerdose0f hepaI们e¨uk Hel】(：2 a‰ked bv ceⅡ se呻【ely AdIlepElom带。f waso}№丌edand cellswere e d蛇sllrvj“rIg c柚cldaled．nm bv册：PcR J珈叫dogy