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果树学报2006，23(2)：252～255
ofFmit
Joumal Science
葡萄卷叶伴随病毒一3复制酶基因克隆
及其在大肠杆菌中的表达
徐章逸1，王国平1，一，洪 霓1’38
(1华中农业大学植物科学技术学院，武汉430070；2农业微生物国家重点实验室，武汉430070；
3国家果树脱毒种质资源室内保存中心，武汉430070)
摘 要：以感染有葡萄卷叶伴随病毒一3(Grapevineleaf南ll—associatedvims一3，GLRaV一3)的葡萄韧皮部组织中提取到
RNA
polymemse，
果表明：R积pcDNA全长为1618
mm01／L的IPTG进
行诱导。SDS—PAGE分析表明，Rd肋在大肠杆菌中被诱导表达，融合蛋白分子量约为61kDa。
关键词：葡萄卷叶伴随病毒一3；复制酶；反转录一聚合酶联反应；原核表达
中图分类号：S663．1文献标识码：A 文章编号：1009—9980(2006)02—252—04
and injecD拓of leaI．-roⅡassociatedVirus一3
CloIling grapeVine
expression
冠棚勋gene
XU Nil，3+
Zhang—yil，WANGGuo—pin91一，HONG
，coffe酽0，刷删Sc据Me∞d死c^Mf呦，，形u矗m，肌6e；43DD70∞iM；2№渤n以‰yL曲矿A删c“f￡Ⅲ埘cr06溉料，形以m，砒6ei
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形以帆，日u6ei钌D070吼in训
Abstract：ThedsRNAwasextractedf南m tissueof caJlesinfected
scrapedphloem grapevine bygr叩e口i，圮如咖肛—仍sDci越ed
usedas forcDNA RNA ofGLRaV一3
秽ir￡龉—3(GLRaV一3)andtemplate synthesis．TheRNA—dependentpolymemse(RdRp)gene
wascloned蚰d consistsof1618nucleotidesaIIdencodesa of538锄ino
sequenced．Thecompletegene polypeptideconsisting
oftlle NYlofGLRaV一3showed innucleotide
oftlle witllthose is01ate
acids(aa)．Comparisonsequences 99．3％similarity
and inaminoacid ofthe witll
sequence99．6％similarity sequence．AlignmentpolypeptideRdRpofpi船叩p如me咖6ug加m
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