2018学年高中生物第二部分酶的应用第4课时α－淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测同步备课教学案浙科版选修1.docVIP

第4课时　α－淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测 考试要求 知识内容 考试属性及要求 考情解读 α－淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测 加试 1.尝试用吸附法制作固定化α－淀粉酶。 2.运用固定化α－淀粉酶进行淀粉水解的测定。 3.说明酶固定化的方法及制作原理。 4.通过此实验探讨固定化酶的应用价值。 一、固定化技术的基础知识 1.酶：酶是生物体内各种化学反应的催化剂，它有高度的专一性和高效性。 2.固定化酶：将水溶性的酶用物理或化学的方法固定在某种介质上，使之成为不溶于水而又有酶活性的制剂。 3.将酶改造成固定化酶的原因：酶在水溶液中很不稳定，且不利于工业化使用。 4.酶固定化的方法有：吸附法、包埋法、交联法和共价偶联法。教材实验中用的是吸附法。 5.固定化酶作用的机理(如图)：将固定化酶装柱，当甲底物经过该柱时，在酶的作用下转变为乙产物。 解决学生疑难点  1.固定化酶的优点是什么？ 答案　固定化酶能够连续使用，但不是永久使用。酶是具有生物活性的大分子，因此随着使用次数的增多，酶活性也会降低，如果酶活性降低到一定程度，就会失去使用价值。 2.根据图示连接固定化技术与原理 答案　A—b—Ⅰ　B—a—Ⅱ　C—c—Ⅲ 3.下列所示的酶固定化技术中属于包埋法的是③④。 1.关于固定化酶技术的说法，正确的是(　　) A.固定化酶技术就是固定反应物，并将酶依附着载体围绕反应物旋转的技术 B.固定化酶的优势在于能催化一系列的酶促反应 C.固定化酶中的酶无法重复利用 D.固定化酶是将酶固定在一定空间内的技术 答案　D 解析　固定化酶技术就是将水溶性的酶利用物理或化学方法固定在某种介质上，使之成为不溶于水而又有酶活性的制剂，其优点是酶被固定在一定装置内可以重复利用，缺点是无法同时催化一系列酶促反应；在固定过程中，固定的是酶而不是反应物，因此A、B、C项均错误。 一题多变 判断正误： (1)固定化酶可反复永久使用(　　) (2)不管是固定化酶柱还是固定化悬浮体，回收后，在一定条件下贮存，还可以利用(　　) (3)酶更适合采用化学结合和物理吸附法固定化(　　) (4)固定化酶可催化一系列的酶促反应(　　) 答案　(1)×　(2)√　(3)√　(4)× 题后反思　直接使用酶和固定化酶的比较 项目 直接使用酶 固定化酶 制作方法 － 吸附法、共价偶联法、交联法、包埋法等 是否需要营养物质 否 否 酶的种类 一种或多种 一种 催化反应 单一或多种 单一 反应底物 各种物质(大分子、小分子) 各种物质(大分子、小分子) 缺点 对环境条件非常敏感，易失活；难回收，成本高，可能影响产品质量 不利于催化一系列反应 优点 催化效率高、耗能低、低污染 既能与反应底物接触，又能与产物分离；可以重复使用；可提高酶的热稳定性 二、α－淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测实验 1.α－淀粉酶的固定化 (1)α－淀粉酶作用的最适条件：最适pH为5.5～7.5；最适温度为50～75_℃。 (2)方法：吸附法，将α－淀粉酶固定在石英砂上。 (3)淀粉的水解作用 淀粉糊精麦芽糖葡萄糖 遇碘显蓝色 　遇碘显红色　遇碘不显色 2.淀粉水解的测定实验 固定α－淀粉酶→滴管滴加淀粉溶液→加KI－I2溶液→观察→洗涤→几天后重复实验。 3.实验步骤 固定化α－淀粉酶，装入注射器中 ↓ 以0.3 mL/min的流速滴加淀粉溶液过柱 ↓ 流出5 mL淀粉溶液后接收0.5 mL流出液 ↓ 滴加KI－I2溶液，观察颜色，稀释1倍后再观察颜色 ↓ 以10倍柱体积的蒸馏水洗涤固定化柱，放置在4 ℃冰箱中，几天后重复实验 结合实验教材，完成下面的实验，并思考后面的问题： 1.实验原理 将α－淀粉酶固定在石英砂上，一定浓度的淀粉溶液经过固定化酶柱后，可使淀粉水解成糊精。用淀粉指示剂测试，若流出物呈红色，表明有糊精生成。 淀粉糊精 　　　(遇碘显蓝色)　　(遇碘显红色)　　 2.实验材料制备 (1)α－淀粉酶的固定化 在烧杯中将5 mg α－淀粉酶溶于4 mL蒸馏水中 　(由于酶不纯，可能有些不溶物) 　　　　　　　　↓ 加入5 g石英砂，不时搅拌 　　　 　30 min后↓ 　将上述溶液装入1支注射器中 (该注射器的下端接有气门心，并用夹子封住) 　　　　　　　　↓ 用10倍体积的蒸馏水洗涤此注射器，以除去未吸附的游离淀粉酶，流速为1 mL/min (2)可溶性淀粉溶液：取50 mg可溶性淀粉溶于100 mL热水中，搅拌均匀。 (3)5 mmol/LKI－I2溶液：称取0.127 g I2和0.83 g KI。加蒸馏水100 mL，完全溶解后装入滴瓶中。 3.实验结果的比较 2.淀粉在各种酶的作用下会依次水解，不同阶段的水解产物遇到指示剂会出现不同的显色反应。下列选项中属于本实