家蝇幼虫抗菌肽天蚕素基因的克隆及其在大肠杆菌中融合表达.pdfVIP

家蝇幼虫抗菌肽天蚕素基因的克隆及其在大肠杆菌中融合表达.pdf

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家蝇幼虫抗菌肽天蚕素基因的克隆及其在大肠杆菌中融合表达.pdf

2007,23(4) 中国人兽共患病学报 Chinese ofZoonoses 311 Journal 文章编号:1002—2694(2007)04—0311—08 oftheantibacterial Cloning peptide cecropingene ●rid lf T ‘ l ‘- 一 ‘ 0t』Ⅵuscadomesticalarvaeandits[usion ● ●11o - · ●‘ in Escherichiacoli expresslon xuJian—hual,ZHU Xiao—ba02,XU Lei—shan2,MAYan2,WANGYan2 Jia—yon92,JIN Qin-yin93,LIU ABSTRACT:Inthe totalRNAwasextractedfromthreeinstarlarvaeofMuscadomestica,thecDNAse— presentstudy,the theORFof was RT-PCR,andthe wasfurther after quenceencoding cecropinsamplifiedby targetfragment sequencedbeing clonedintoTvector cDNA ofthemature was PCRwith pUCm-T.Then,thesequence cecropins by amplified as N-terminalrareeodonGGAofE.coliwas tothefavorablecodonGGC, pUCm-T/cecropintemplate.the changed plasmid andaAsncodonAACwasaddedinfrontofthe codenTAAintheC-terminus.Thismutant as stop genedesignatedmCecropin wasthen withthefusion vector restrictionandDNA re— ligated expressionpGEX-4T-1.Afteranalysis sequencing,thepositive combinant wastransformedtodifferentstrainsofE.colicellsandthefusion wasex— plasmidpGEX-4T-1/mCecropin protein afterIPTGinduction.Thefusion was SDSandtheE.coli

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