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【精选】显微鉴定
植物细胞的结构
紫色洋葱细胞
碘化铋钾的配制:直接用碘化铋钾0.85g,加冰醋酸10ml与水40ml溶解后,摇匀,即得。
水合氯醛的配制:
稀甘油配制:
稀碘液配制:
碘-碘化钾溶液配制:
临时装片的制作方法
操作步骤口诀:擦、滴、取、展、盖、染、吸。
1、准备
擦——用洁净的纱布把载玻片和盖玻片擦拭干净
滴——把载玻片放在实验台上,用吸管在载玻片上滴一滴蒸馏水
2、制片
取(撕、刮、切、挑)——用镊子从洋葱鳞片叶内表皮上撕取一小块方形透明薄膜
放(展、抹)——将撕下的洋葱鳞片叶内表皮浸入载玻片上的水滴中,用镊子轻轻展平
盖——用镊子轻夹盖玻片的一边,使盖玻片另一边先接触载玻片上的水滴,而后慢慢地把盖玻片轻轻盖在材料上,尽量避免气泡产生。如有气泡,可用镊子从盖玻片的一侧掀起,然后再慢慢重新盖上。如有水溢出盖玻片,用吸水纸吸干净
3、染色
染——滴一滴染液(中性红试液、碘化钾试液)在盖玻片一侧,用吸水纸在另一侧吸引,直至染液浸润到标本的全部,如有染液溢出,用吸水纸吸干净
洋葱内表皮细胞注意识别下列各部分:
(1)细胞壁为植物细胞所特有。为细胞的最外层,比较透明。调节细调焦螺旋可见两细胞间实际上为三层;两侧为相邻两个细胞的细胞壁;中间是两个细胞共有的胞间层。
(2)细胞质:为无色透明的胶状物,紧贴在细胞壁以内,被中央大液泡挤成一薄层,仅细胞两端较明显。
(3)细胞核:埋在细胞质内;贴近细胞侧壁的只见其窄蔺,呈扁圆形,贴在上、下整的可见其宽面,呈球形。仔细观察,可见包在细胞核外面的核膜,细胞核内有1—3个发亮的颗粒,即核仁。(有的细胞看不见细胞核是因为该细胞被撕破,只剩一半了)
(4)液泡:位于细胞中央,占细胞体积的大部分,由于澈泡内充满细胞液;所以比细胞质更透明。
植物细胞后含物
1.观察马铃薯淀粉粒
淀粉粒在形成时,先从一个点(脐点)开始,向外层层沉积,形成许多同心的层次——层纹(直链淀粉和支链淀粉交替沉积而成)。
切取马铃薯一小块,用刀片刮少许混浊液,置于载玻片上,或用马铃薯块直接涂片,加蒸馏水一滴,盖上盖玻片。
2.观察半夏淀粉粒和草酸钙针晶
草酸钙结晶类型:蔟晶、针晶、方晶、砂晶、柱晶。
1.用牙签挑取少许半夏粉末,置于载玻片的蒸馏水滴中,搅匀,盖上盖玻片,将标本片置显微镜下观察。
2.水合氯醛透化装片:在载玻片中央加水合氯醛试液1-2滴,用牙签挑取半夏粉末适量,置于水合氯醛试液中,拌匀,置酒精灯上微热,并用牙签不断搅拌,稍干(切勿烧焦),离火微冷,再上法处理1-2次,最后滴加稀甘油,盖上盖玻片。
半夏草酸钙针晶:存在于薄壁细胞中,成束或散在,针晶束呈淡黄色或深灰色,散在的则无色透明,有较强的折光性。
表面标本片
主要用于叶片、萼片、花瓣和雄蕊等表皮的表面特征观察
1)整体封藏法——适用于很薄的叶片、萼片、花瓣
方法一:剪取2小片置载玻片中央(0.5cm见方,一正一反)→加水合氯醛溶液2~3dr→反复2~3次~2dr→盖盖玻片→清洁→观察
方法二:剪取材料1cm见方→放入小烧杯或试管中→加水合氯醛溶液2~3ml
隔石棉网(△) →透明状(约10分钟)→取出材料切开成等大的2片
一正一反面置载玻片→加稀甘油2~3dr→盖盖玻片→清洁观察
2)表皮撕离法——适用于较厚的叶片、萼片、花瓣
将药材的表皮直接用尖头镊子撕离下来,如带有其它各组织时用解剖刀轻轻除去,表皮正面朝上置载玻片中央→加水合氯醛溶液2~3dr微透化一次→稀甘油1~2dr→盖盖玻片→清洁观察。
操作:以镊子自下表面夹住少许叶片,往 一侧撕取表皮。将撕下的表皮外表面朝上 置于滴有1~2滴水的载玻片上,使其自然展 开,盖片观察。
粉末临时制片操作要领
粉末用量:米粒大小。
每次滴加装置液2~3滴。
每次滴加装置液后需要搅拌均匀。
控制搅拌范围约为盖玻片大小。
如加热透化,则重复进行3~4次,沸即离火,勿烧干、焦。
加盖玻片时应先一侧接触装置液,缓缓 放下,最后抽出镊子,以排除气泡。
以吸水纸吸去溢出的装置液。
稍放置待凉后,镜检。
水装片或斯氏液装片
适用于观察淀粉粒。
装置液:蒸馏水或斯氏液(甘油醋酸)。
不可加热,否则淀粉粒糊化。
水合氯醛加热透化装片
适用于除淀粉粒、菊糖以外的大多数组织、细胞、细胞后含物的观察。
装置液:水合氯醛(水合三氯乙醛)、 稀甘油。
需要加热。
水合氯醛或乙醇装片
适用于观察菊糖。
装置液:水合氯醛或乙醇。
不可加热,否则菊糖溶解。
水合氯醛装置液的作用
使细胞膨胀,便于观组织、细胞及其 内含物特征。
去除细胞表面或内部杂质。
增强透明度。
稀甘油装置液的作用
增加透明度。
防止气泡生成。
防止水合氯醛结晶析出。
(一)粉末制片技术和大黄的鉴别实验参考内容:
大黄
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