纳米探针与诊断技术幻灯片.pptVIP

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * ? 主要成果有： 建立了单分子荧光成像系统；首次将单分子技术与光纤技术结合，实现了利用光纤探针进行单分子检测及CCD成像的新方法。这种方法简单有效,并可结合光纤生物传感器技术，用于研究在单分子水平上生物分子相互作用。 ?????????? 开发了新型DNA探针“Molecular Beacon”的固定化方法。Molecular Beacon 是一种带有荧光基团的DNA分子，它具有背景信号低，灵敏度高，特异结合选择性强的优点。利用这种固定化方法制成的亚微米至纳米级光纤生物传感器, 纳米颗粒传感器及DNA阵列传感器在基因诊断，基因治疗，新药研制方面有很广泛的应用前景。 首次将Molecular Beacon DNA探针用于DNA、蛋白质相互作用的研究。开辟了定量分析DNA、蛋白质相互作用的新途径。 首次提出并实现了将Molecular Beacon与Aptamer技术相结合，发展全新的适合于蛋白质研究的Molecular Beacon Aptamer 蛋白质探针，它们能有选择性的结合特定蛋白质，用于测定体内蛋白质和研究其功能。 发展了多种提高毛细管电泳蛋白质，DNA分离分析柱效的新方法，如锥型毛细管等电聚焦法等。在各类期刊杂志上发表学术论文30余篇，其中有关光纤探针单分子成像的论文在美国分析化学(Anal.Chem.)上发表后，受到美国光学学会杂志Photonics Spectra的专访。 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 实验方法 水相合成CdTe量子点荧光探针简介 水相合成CdTe量子点荧光探针简介 实验方法 水相合成CdTe量子点荧光探针简介 实验方法 （四）量子点偶联蛋白 水相合成CdTe量子点荧光探针简介 实验方法 实验结果 水相合成CdTe量子点荧光探针简介 实验结果 水相合成CdTe量子点荧光探针简介 四、纳米磷光探针的制备及 特征 纳米磷光探针是将磷光染料包埋或键合在生物兼容性好的惰性基质中，利用微注射、基因枪轰击、脂质体转移等方法将其转入细胞中，从而对细胞内的特定物质进行检测。 同荧光相比，磷光具有较大的Stokes位移、与激发光谱重叠少，寿命长等特点，因此其具有更好的选择性。 一）纳米磷光探针的制备 试剂： 1一溴一2一甲基萘(ACROS，ORGANICS)； 甲基丙烯酸(ACROS，ORGANICS)； 硫酸铜(北京化学试剂三厂，分析纯)； 烯丙基溴 (ACROS，ORGANICS)； 十二烷基硫酸钠(天津市博迪化工有限公司，分析纯)； 氯化汞(北京化工厂，分析纯)； 氯化钡，氯化钙，氯化钴，硫酸锌，氯化镍等 纳米磷光探针的制备 仪 器： 荧光光谱仪(Cary Eclipse，Vafian)， Jy92一Ⅱ超声波细胞粉碎机(宁波新芝生物科技股份有限公司)； TEM电子透射扫描仪(HITACHIH一600)； 透析袋(上海生工，SP133116)； TU一1901紫外一可见吸收光谱仪(北京普析通用公司)。 纳米磷光探针的制备 制备方法： 1、 2 g镁粉和7 mL的烯丙基溴反应制得Grignard试剂。 2、用1-溴-2-甲基萘同N-溴代丁二酰亚胺反应得到1-溴-2-溴甲基萘(BBN)。 3、取l-溴-2-溴甲基萘10．45 g，与 Grignard试剂反应，得到1-溴-2-(3-丁烯基)萘 4、硅胶柱进一步纯化，再用乙醇配成0．107 mol／L溶液。取甲基丙烯酸与适量十二烷基硫酸钠，二次水定容至40 mL。在超声下搅拌 。 纳米磷光探针的制备 结 果： 磷光纳米探针颗粒平均尺寸为(40±10)nm，分布在30-50 nm之间的数量占到85％ 。 二）纳米磷光探针的特征分析 纳米磷光探针的磷光光谱： 在波长为288nm光激发下磷光发射带峰值为532 nm，在不通氮除氧的条件下磷光强度为149。在通入N 的条件下可以得到强度为633的磷光. 纳米磷光探针的特征分析 溶剂极性对探针磷光的影响 三种溶剂对纳米探针 磷光强度影响所对应 的猝灭方程分别为： Ya=-0.487 +6O.2； yb=-0.709x+6O.5； yc=-0.767 + 58.8 (探针在极性强的溶液中稳定性更好 ) 纳米磷光探针的特征分析 磷光探针对铜离子的传感 浓度在1.0×10～ 1.0×10-4 mol／L范