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血细胞的正常形态学特征 红细胞系统 原红细胞 原红 晚幼红细胞 中幼红细胞 原粒细胞 早幼粒细胞 中幼粒细胞 粒细胞系统 晚幼粒细胞 分叶核粒细胞 杆状核粒细胞 粒细胞系统 原淋巴细胞 幼淋巴细胞 大淋巴细胞 小淋巴细胞 淋巴细胞系统 原单核细胞 幼单核细胞 单核细胞 单核细胞系统 浆细胞系统 原浆细胞 幼浆细胞 浆细胞 巨核细胞系统 颗粒型巨核细胞 幼巨核细胞 原巨核细胞 血小板 巨核细胞裸核 产血小板型巨核细胞 血细胞的细胞化学染色(P272) 1. 过氧化物酶(POX)染色: 【principle】:粒细胞和部分单核细胞的溶酶体颗粒中含有POX,POX能分解试剂中的底物H2O2,释放新生态氧,使无色联苯胺氧化为蓝色联苯胺,后者与亚硝基铁氰化钠结合形成蓝黑色的颗粒,沉着于细胞质中。 【Clinical significance】: 主要用于急性白血病类型的鉴别: 急性粒细胞白血病时,白血病细胞多呈强阳性反应; 急性单核细胞白血病时, 呈弱阳性反应或阴性反应; 急性淋巴细胞白血病呈阴性反应。 2.中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)染色 【principle】:(偶氮偶联法)血细胞中的碱性磷酸酶在pH为9.4~9.6的条件下将基质中的α磷酸萘酚钠水解,产生α-萘酚与重氮盐偶联形成灰黑色沉淀,定位于细胞质内酶活性所在之处。 正常人的白细胞碱性磷酸酶于成熟中性粒细胞(分叶核及杆状核)可见。 判断标准及分级 计算积分值 油镜下计数100个成熟中性粒细胞,分别记录其分级情况,全部阳性反应之和,即为阳性率。将各种积分的百分率乘以该积分数,然后相加,即为总积分值。NAP阳性率10%~40%,积分40~80。 NAP染色判断标准及分级 -??????? 0分?? 胞质中无阳性染色颗粒+??????? 1分?? 胞质中含少量颗粒或弥漫浅色?++????? 2分?? 胞质中含中等量颗粒或弥漫深色 +++??? 3分?? 胞质中含较多颗粒或弥漫较深色++++? 4分?? 胞质充满粗大颗粒或弥漫深色 NAP用于下列疾病的鉴别诊断 感染性疾病的鉴别: 化脓菌感染NAP 病毒性感染NAP 慢性粒细胞白血病 ,类白血病反应 PNH ,AA(再障) 急性粒细胞白血病 ,急性淋巴细胞白血病 3.铁染色: 【principle】:骨髓内的铁蛋白及含铁血黄素(细胞外铁)和幼红细胞内的铁粒(细胞内铁)在盐酸环境下与亚铁氰化钾作用,生成亚铁氰化铁,在普鲁士蓝染色中,铁可染成蓝色颗粒,小珠及小块。 铁染色示意图,图中蓝色箭头所指为细胞内铁, 黑色箭头所指为细胞外铁 ++++ +++ ++ + 细胞外铁分级示意图 【reference value】: 细胞外铁:正常人细胞外铁为“十”~“十十”。“十”有少量铁粒或仅见少量铁小珠;“十十”有多量铁粒和铁珠; 细胞内铁(铁粒幼细胞):阳性细胞(胞质中有蓝色颗粒者)的百分率为20%~90%。无环状铁粒幼细胞。 【Clinical significance】: 贫血的诊断和鉴别诊断 缺铁性贫血(IDA):细胞外铁消失,细胞内铁(铁粒幼细胞)<15%甚至阴性。 2.非缺铁性贫血(珠蛋白生成障碍性贫血、溶血性贫血、巨幼细胞性贫血等),细胞外铁多增加。 3. 铁粒幼细胞贫血:细胞外铁增多,出现较多环状铁粒幼细胞。 铁粒幼细胞贫血细胞内铁百分率增多,形成环状铁粒幼细胞 血红蛋白尿 游离血红蛋白 氧化 高铁血红蛋白 珠蛋白 高铁血红素 + 清蛋白 高铁血红素清蛋白 × Thank You! * * 酸化溶血试验(Ham试验)(P265) 【principle】:阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)患者的红细胞膜有缺陷,对补体敏感性增高,在酸化的正常血清中,经37℃孵育,易破坏溶血。 【normal value】:正常人为阴性。 【Clinical significance】: 阳性:主要见于阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH),是PNH的确诊试验。 酸化溶血示意图,左管上清红色为溶血试验阳性,右管上清无色为阴性 溶血性贫血常用的特殊检查 红细胞酶缺陷的检测(P262) 高铁血红蛋白还原试验 高铁血红蛋白还原试验 【principle】:在有足量的NADPH存在下,反应液中的高铁血红蛋白能被高铁血红蛋白还原酶还原成(亚铁)血红蛋白。当葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PD)含量正常时,由磷酸戊糖代谢途径生成的NADPH的数量足以完成上述还原反应。反之,则还原速度减慢,甚至不能还原。 高铁血红蛋白试验示意图,右边试
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