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12.3.2 吸光分析法的仪器简介 * 第*页 紫外-可见分光光度计组件 光 源 单色器 样品池 检测器 信号输出 氢灯,氘灯,185 ~ 350 nm;卤钨灯,340 ~ 2500 nm. 基本要求:光源强,能量分布均匀,稳定 作用:将复合光色散成单色光 棱镜 玻璃,350 ~ 2500 nm, 石英,185 ~ 4500 nm 光栅 平面透射光栅, 反射光栅 玻璃,光学玻璃,石英 作用:将光信号转换为电信号,并放大 光电管,光电倍增管,光电二极管,光导摄像管(多道分析器) 表头、记录仪、屏幕、数字显示 * 第*页 (1) 工作曲线法 配制一系列标准溶液,在相同条件下比色测定吸光度A ,以A为纵坐标、浓度为横坐标作图可得一条曲线,这条曲线叫工作曲线或标准曲线,再用同法配制试样液,同样条件下测其吸光度,据吸光度A值在工作曲线上查出试样液的浓度,这种方法叫工作曲线法。 * 第*页 C O A 标 准 溶 液 未知样 浓 度 c1 c2 c3 c4 c5 c6 cx 吸光度 A1 A2 A3 A4 A5 A6 Ax 12.4 吸光光度法应用简介 单组分的测定 纯物质或共存物质不干扰 (2) 比较法 在相同条件下测一标准溶液和试样 溶液的吸光度A,则两溶液的浓度之比 就等于吸光度之比, Cs/Cx=As/Ax Cx=Cs Ax/As * 第*页 未知样 O C A 一般要求Cs与Cx相近,这样可避免 产生较大的测量误差。 考 试 范 围 光的吸收定律及其有关计算。 显色条件和光度测量条件的选择方法 光度分析法注意事项和主要步骤。 * 第*页 * 第*页 要 点: 1、Plank 条件 2、物质的电子结构不同,所能吸收光的波长也不同,这就构成了物质对光的选择吸收基础。 3、在一定的实验条件下,物质对光的吸收与物质的浓度成正比 吸光定律 c:mol / L 摩尔吸光系数, L·mol –1·cm -1 K?? c:g / L K?a 吸光系数,L·g –1·cm -1 0.575 吸收定律的推导 * 第*页 I0 db b It I I-dI dI ∝ N I N :薄层中的吸光粒子数 N = N0 c dS db N0 :阿伏加德罗常数 dS :捕获面积,薄层中被光照射的面积。 c:吸光溶液的浓度 N = k’ c db 故 dI ∝ N I = I k’ c db dI = - I k c db , dI / I = - k c db 积分 得 或 得 * * * * * * * * * * * * * * * * * 上一页 上一页 上一页 下一页 总目录 尚辅网 / * 第*页 第12章 吸光光度分析法 主要内容: 一、吸光光度法的基本原理 光的基本性质 物质对光的吸收 溶液的吸光定律 二、显色反应与分析条件的选择 三、吸光分析法的方法与仪器简介 四、吸光光度法应用简介---单组分的测定 目视比色法 光电比色法 12.1.1 光的基本性质 * 第*页 吸光光度法 是基于被测物质的分子对光具有选择 吸收的特性而建立的分析方法。 光的电磁波性质 ? ?射线 x射线 紫外光 红外光 微波 无线电波 10-2 nm 10 nm 102 nm 104 nm 0.1 cm 10cm 103 cm 105 cm 可 见 光 12.1 吸光光度法的基本原理 光的波粒二象性 * 第*页 波动性 粒子性 ? ? E 光的折射 光的衍射 光的偏振 光的干涉 光电效应 E:光子的能量(J, 焦耳) ?:光子的频率(Hz, 赫兹) ?:光子的波长(cm) c:光速(2.9979?1010 cm.s-1) h:Plank常数(6.6256?10-34 J.s 焦耳.秒) 单色光、复合光、光的互补 * 第*页 单色光 复合光 光的互补 单一波长的光 由不同波长的光组合而成的光 若两种不同颜色的单色光按一定的强度比例混合得到白光,那么就称这两种单色光为互补色光,这种现象称为光的互补。 紫红 绿 紫 黄 蓝 橙 红 蓝绿 12.1.2 物质对光的吸收 * 第*页 物质的颜色与光的关系 完全吸收 完全透过 吸收橙色光 光谱示意 表观现象示意 复合光 * 第*页 吸收光谱:光作用于物质时,物质吸收了可见光,
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