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[临床医学]血脂及血浆脂蛋白检验
五、血清载脂蛋白测定 ——免疫透射比浊法测定血清载脂蛋白AI和载脂蛋白B 原理: 抗原抗体按一定比例反应时,在溶液内生成细小颗粒的抗原抗体复合物均匀分散在溶液介质内。当光线通过这一混浊液时,混浊液内的颗粒能吸收光线,光线被吸收的量与混浊颗粒的量成正比,这一定量方法称为免疫透射比浊法。 血清ApoAI或ApoB与试剂中ApoA或ApoB抗体相结合,在一定条件下形成不溶性免疫复合物,使溶液混浊,混浊度与ApoAI或ApoB的量成正比,即浊度与吸光度成正比,以此作为定量测定ApoAI或ApoB的依据。 * 评价 优点:简单快速,可以自动化批量分析 缺点:对抗血清的质量要求高,且消耗抗血清较多。 参考值 ApoAI:1.00~1.50g/L,ApoB:0.80~1.00g/L。 * 临床意义 血清载脂蛋白主要配合血清甘油三酯和血清总胆固醇测定用于诊断和预测动脉粥样硬化。 ApoAI是HDL的主要蛋白质,HDL的主要功能是将外周组织的胆固醇运往肝。ApoB是LDL的主要蛋白质,LDL的主要功能是将肝的胆固醇运向肝外组织。 由于LDL浓度过高可引起动脉粥样硬化。因此,测定ApoAI、ApoB,及其两者比值较测定HDL-C和LDL-C更能直接反映血浆脂蛋白的变化,具有更大的临床价值。 冠心病、肾病综合征和糖尿病等都有ApoAI下降和ApoB升高。临床上常将ApoAI和ApoB比值作为冠心病的危险指标。 * 思考题: 1、什么是血脂,包括哪些? 2 、试述血浆脂蛋白的分类 3 、原发性高脂血症可分为哪几型?各型的生化特征? 4、血脂分析标本,病人应空腹几小时? 5、试述血清总胆固醇及甘油三酯测定原理及意义? 6、什么叫载脂蛋白? APOA1 、 APOB100 、 APOCⅡ的主要作用? 7、血清载脂蛋白测定有何意义?APOA1、APOB100与HDL、LDL的关系? * 思考题: 1、简述血脂的超速离心法和电泳法的分类 2、脂蛋白受体主要有 、 和 。 3、高脂蛋白血症分类的方法主要有 、 和 三种。 4、磷酸甘油氧化酶法测定TG的结果中包含了FG,若要去除FG得到真正的TG值,可用 法或 法。 5、HDL-C测定的参考方法是用 法分离HDL,然后用 法或 法 测定其胆固醇含量。 6、HDL-C与冠心病发病呈 相关。LDL-C增高是 发生发展的主要脂类危险因素。 7 、正常人群的Lp(a)水平呈明显的 分布。 8、脂蛋白按密度由低到高排列的正确顺序是如何? 9、脂蛋白LDL分子中含量最多的是什么? 10、简述血清甘油三酯的磷酸甘油氧化酶法测定原理。 11、哪一种脂蛋白是运输内源性甘油三酯的主要形式? * * 依据不同脂蛋白的密度差异,在离心时漂浮速率不同而进行分离。 密度差异缘于脂蛋白分子中蛋白质和脂类的含量不同,蛋白质含量较高,脂类含量较低者,密度较大,否则反之。 标准的分析方法是在密度为1.063g/ml(相当于1.75mol/L Nacl溶液的密度)的介质中进行密度小于1.063的脂蛋白向上漂浮,越小者漂浮得越快 密度大于1.063的脂蛋白(HDL)则向下沉降 漂浮快慢以Sf值的大小来表示 * 原料来源:a.糖代谢中转变形成的FA和甘油 b.脂肪组织动员产生的FA c.CM→FA 2.临床表现: 常于20岁前发病,家族史明显者,丘疹状黄色瘤的发病率可高达30%-50%,并伴有胰腺炎、肝脾肿大;葡萄糖耐量异常、尿酸血症以及缺血性心脏病等。 3. 生化特征: (1)血清外观:上层奶油层、下层混浊。 (2)血脂分析:TG↑ ↑ ↑ Ch 正常或↑ (3)电泳图谱:可见CM及前?-脂蛋白深染 (4)脂蛋白:CM ↑、 VLDL ↑ * * * 继发性高脂蛋白血症(secondary hyperlipoproteinemia) 继发性高脂蛋白血症(secondary hyperlipoproteinemias)比原发性高脂蛋白血症更为多见,成人的发病率为3%~5%,常继发于糖尿病、肝胆疾病和肾病等。过量摄入糖或饮酒也可引起继发性高脂蛋白血症。(1)糖尿病;(2)甲减; (3)肾病综合征; (4)急性肝炎; (5)酗酒. * (二)低脂蛋白血症(自学) 1.家族性低β-脂蛋白血症 2.β-脂蛋白缺乏血症 3.家族性低α-脂蛋白血症 4. Tangier病 * 第二节 血脂、脂蛋白及载脂蛋白测定 一、血清(浆)静置试验 二、血清(浆)总胆
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