铁皮石斛组培讲义培训资料.ppt

铁皮石斛的组织培养;一、铁皮石斛的基本概念： 1、概念： 铁皮石斛，为兰科多年生附生草本植物，石斛属。全世界兰科约有500属，15000多种，石斛属是兰科中最大的属之一。生于海拔达1600米的山地半阴湿的岩石上，喜温暖湿润气候和半阴半阳的环境，不耐寒。一般均能耐－5℃的低温。铁皮石斛为石斛之极品，它因表皮呈铁绿色而得名。铁皮石斛具有独特的药用价值，以其茎入药，中药名：石斛。 ;2、形态特征： 茎直立，圆柱形，长9-35厘米，粗2-4毫米，不分枝，具多节，节间长1-3-1.7厘米，常在中部以上互生3-5枚叶；叶二列，长圆状披针形，基部下延为抱茎的鞘，边缘和中肋常带淡紫色；叶鞘常具紫斑，老时其上缘与茎松离而张开，并且与节留下1个环状铁青的间隙。总状花序常从落了叶的老茎上部发出，具2-3朵花；浅白色，卵形，萼片和花瓣黄绿色，唇盘密布细乳突状的毛，并且在中部以上具1个紫红色斑块；蕊柱黄绿色，长约3毫米，花期3-6月。;二、铁皮石斛的药用价值： （1）增强免疫功能 （2）促进消化 （3）护肝利胆 （4）抗风湿 （5）降低血糖血脂降低血胆固醇和甘油三脂。 （6）抗肿瘤 （7）保护视力 （8）滋养肌肤 （9）抗衰老　;;器官发生型途径： 器官发生型通过外植体组织培养，使预先存在的分生组织形成芽(如腋芽)或不定分生组织(如子叶、茎段、愈伤组织等)形成不定芽。 ;;;实验材料;培养基附加物： （1）天然添加物 在基本培养基中加人香蕉汁、马铃薯汁、绿豆芽汁、苹果汁仁、椰子乳等能促进铁皮石斛幼苗的生长和根系的发育，香蕉汁的促进作用最为显著。（2）炭源 铁皮石斛在生根培养时加入活性炭有利于试管苗的生长，能使根系长得更加粗壮闭。唐桂香等认为在培养基中添加活性炭有助于提高试管苗的成活率，但对苗的根数和根长影响小。;培养条件 石斛组培常用的温度为(26±1) ℃ 光强1 600～2 000 lx 日照光8~12h/d （1）组培苗在光照度为2000lx ，温度以22 ℃ 为宜。 (2) 在20 一22 ℃ 时丛生芽增殖较好，温度超过25 ℃ 丛生芽就开始分化成苗。;;②材料二次消毒灭菌 将上述完成后的材料带到无菌室超净工作台上，进行二次消毒灭菌: 将茎段腋芽的苞叶拨去。 70% 的酒精速浸25s， 用0.1%的升汞溶液浸泡10min， 用无菌水冲洗5 次，灭菌过程中不断摇动烧杯使灭菌更加彻底，以去掉表面药物残留。;③接种 将已经灭菌地石斛茎段，在无菌条件下切成至少带有一个茎节地茎段，接种于事先准备好的诱导芽培养基中诱导出芽。 ?从茎尖或茎段培养得到的小苗，大多数是无根小苗，需转入1／2MS加马铃薯进行生根和壮苗培养，才能出管移栽。 ;; 石斛试管苗可直接栽在树干或岩石上，也可以盆栽。在阴凉潮湿、长有苔藓的树干和岩石上，栽种石斛成活率高。盆栽选用木屑、吸水石、砂岩、片麻岩等作基质，然后覆上苔藓或青杠树树皮粉进行栽种，效果较好。试管苗栽后宜放在荫棚内，荫蔽度要求60％～80％。石斛喜湿润，怕积水。积水会使根茎腐烂，叶片脱落而死。当移栽苗根伸长后，每月用MS大量元素1000倍稀释液喷施追肥，促进生长发育。 ;原球茎增值 ;; 谢谢！