[医学]第十一章 转录.pptVIP

在生物界，RNA合成有两种方式： ?一是DNA指导的RNA合成，也叫转录，此为生物体内的主要合成方式，也是本章介绍的主要内容。 另一种是RNA指导的RNA合成(RNA-dependent RNA synthesis)，也叫RNA复制(RNA replication), 由RNA依赖的RNA聚合酶(RNA-dependent RNA polymerase)催化，常见于病毒，是逆转录病毒以外的RNA病毒在宿主细胞以病毒的单链RNA为模板合成RNA的方式。 转录的条件 转录的原料：四种三磷酸核糖核苷（NTPs ） ATP、GTP、CTP、UTP 模板——DNA链 酶: RNA聚合酶(RNA polymerase, RNA-pol) 其它蛋白因子——ρ因子 DNA双链中按碱基配对规律能指引转录生成RNA的一股单链，称为模板链(template strand)。相对的另一股单链是编码链(coding strand) 。 各个基因 的模板链不都在同一条链上。 DNA聚合酶在启动DNA链延长时需要引物存在，而RNA聚合酶不需要引物就能直接启动RNA链的延长。 RNA聚合酶和DNA的特殊序列——启动子(promoter)结合后，就能启动RNA合成。 帽子结构 核酶的发现，对中心法则作了重要补充； 核酶的发现是对传统酶学的挑战； 利用核酶的结构设计合成人工核酶 。 *转录和复制的相同点 都是酶促的核苷酸聚合过程 都以DNA为模板 都需依赖DNA的聚合酶 聚合过程都是核苷酸之间生成磷酸二酯键 都从5’至3’方向延伸聚核苷酸链 都遵从碱基配对规律 转录 不对称转录 RNA－pol（全酶、核心酶） 启动子 转录空泡 断裂基因 转录终止机制 真核生物mRNA转录后加工及其意义 结合tRNA结构理解tRNA转录后加工 转录与复制的异同点 2. 3’-端尾巴的形成 ◆真核生物的成熟的mRNA 3’-端通常都有20~200个腺苷酸残基，构成多聚腺苷酸（polyA）尾巴。 ◆3’-末端切除多余核苷酸及加尾信号是3’-端一段保守序列AAUAAA。 ★ 5’-末端的帽结构：m7G-5ppp5’-Np 保护RNA免受核酸外切酶的水解 促进核糖体与mRNA的结合、加速翻译的起始速度 ★ 3’-末端的polyA结构: 增强mRNA的稳定性，提高翻译效率 参与mRNA从核内向胞质的转移 **真核生物 mRNA 的特点 （阅读框） （二）mRNA的剪接 1. hnRNA 和 snRNA hetero-nuclear RNA, hnRNA snRNA (small nuclear RNA 核内的蛋白质 小分子核糖核酸蛋白体 （并接体, splicesome） snRNA 真核生物结构基因，由若干个编码区和非编码区互相间隔开但又连续镶嵌而成，去除非编码区再连接后，可翻译出由连续氨基酸组成的完整蛋白质，这些基因称为断裂基因。 **断裂基因(splite gene) C A B D 编码区 A、B、C、D 非编码区 2. 外显子(exon)和内含子(intron) 外显子（exon） 在断裂基因及其初级转录产物上出现，并表达为成熟RNA的核酸序列。结构基因中有表达活性的编码序列。 内含子（intron） 隔断基因的线性表达而在剪接过程中被除去的核酸序列。结构基因中无表达活性的非编码序列。 剪接是把hnRNA中的内含子除去，把外显子连接起来。 内含子弯成套索状，称套索RNA（lariat RNA），外显子相互靠近并连接。 鸡卵清蛋白基因 hnRNA 首、尾修饰 hnRNA剪接 成熟的mRNA 鸡卵清蛋白基因及其转录、转录后修饰 鸡卵清蛋白成熟mRNA与DNA杂交电镜图 DNA mRNA 二、tRNA的转录后加工 tRNA前体 RNA pol Ⅲ TGGCNNAGTGC GGTTCGANNCC DNA 1、剪切 核糖核酸酶 tRNA核苷酸转移酶、连接酶 ATP ADP 2、加上CCA-OH的3’-末端 （2）还原反应 如：U ? DHU （3）核苷内的转位反应 如：U ? ψ （4）脱氨反应 如：A ? I 如：A ? Am （1）甲基化 （1） （1） （3） （2） （4） 3、碱基修饰 四、核 酶 具有酶促活性（酶的活性）的RNA称为核酶。 核酶(ribozyme) 最简单的核酶二级结构——槌头状结构 (hammerhead structure) 底物部分 通常为60个核苷酸左右 同一分子上包括有催化部份和底物部份 催化部份和底物部份组成锤头结构 核酶能起作用的结构要求，至少含有3 个茎（RNA分子内配对形成的