6-高等植物遗传转化系统宣讲培训.pptVIP

高等植物遗传转化系统 The System for Plant Gene Manipulation;高等植物遗传转化系统; 病毒载体介导的植物遗传转化;缺点： 目前对植物病毒分子生物学研究十分初浅，还不能建立有效遗传转化体系。迄今为止，植物病毒载体尚未发展到可以广泛使用的阶段。 ;重组双子座病毒载体系统感染植物示意图;高等植物细胞直接转化法;三 生殖细胞原位转化法;2 花粉介导法：收集成熟花粉，基因枪等转化花粉，后用转化后的花粉授于成熟的柱头上，最后搜集成熟的种子。 优点：避开组织培养再生的过程，技术简单，不需要装备精良的实验室，适合于难以再生的植物，常规育种工作者易于掌握 。 缺点：技术尚不成熟；筛选工作量大，转化效率较低。;四 显微注射转化法;五 激光微束穿刺法;六 PEG介导法;基因枪及动力源的类型;基因枪转化法的影响条件;影响基因枪法遗传转化的因素;轰击前后的培养条件;基因枪的轰击参数;基因枪转化操作;PDS-1000 ;一种手持基因枪;基因枪转化流程;转化方法;七 叶绿体基因工程;叶绿体基因工程内容;叶绿体基因工程的优越性;烟草叶绿体转基因载体（图例）;八 转基因沉默;转基因沉默机制;转基因沉默机制;克服转基因沉默的策略;3 利用MAR序列 MAR为基质附着区，核酸与核骨架结合的序列。一般认为MAR位于转录活跃的DNA环状结构边界，可阻断附近序列对基因表达的影响。将MAR序列构建到转基因的两侧，可使转基因稳定、高效表达。 4 利用位置特异性重组系统 Cre/lax、Flp/frt、R/rs、Gin/gix四种重组系统可实现单拷贝、位点特异性整合。方法为将Cre、Flp、R、Gin四种重组酶基因构建到转基因表达载体上，转化受体植物带有lax、frt、rs、gix识别位点。可避免多拷贝失活及位置效应。 5 选择单拷贝转化体 ;转基因植物安全性争议;2 帝王蝶（Monarch butterfly）事件 1999年美国康奈尔大学Losey等报道实验室内以拌有转Bt基因抗虫玉米花粉的马利筋草喂养帝王蝶幼虫可导致死亡，并认为转基因威胁非目标昆虫。“环境主义”组织据此提出应限制转基因玉米的生产与销售。 美国环境保护局（EPA）组织昆虫专家们进行了专题研究，结论认为抗虫玉米花粉在田间对帝王蝶并无威胁，原因: （1）玉米花粉大而重，扩散不远，在田间花粉只落在10码以内，距玉米5米的马利筋杂草每平方厘米叶子上只发现一粒花粉； （2）帝王蝶通常不吃玉米花粉，且在玉米散粉后才大量产卵； （3）美国中西部转Bt基因玉米占玉米面积的25％，但田间的帝王蝶数量却很大。 EPA报告指出，评价转基因作物对非靶标昆虫的影响，应以野外实验为准，而不能仅仅依靠试验室的数据。;3 墨西哥转基因玉米“污染”事件;科学界对转基因安全性的态度;美国科学界的支持态度。农业生物技术具有巨大的潜在价值；没有证据表明从其它生物向植物转入基因会有特别的风险；由农业生物技术培育出的抗虫品种对帝王蝶及其它非目标昆虫的威胁实际上不显著；标识农业生物技术产品是提供误导信息，可能会使消费者对食品安全产生混乱；联邦政府的管理应重点放在植物的特性、对它计划的用途以及拟种植此植物的环境，而不是培育该植物的方法等。 反对转基因的欧洲仍然进行了大量的转基因作物的田间试验。据欧盟联合研究中心的数据显示，到2001年4月止，欧盟国家共进行了1，668例田间试验。在反对声比较强烈的英国，也新增了58处田间试验点，并在苏格兰选了5处作农场规模的试验。 ;目前全球基因作物种植面积的前四名分别是美国、阿根廷、加拿大和中国。其中，美国种了 3570 万公顷，阿根廷 1180 万公顷、加拿大 320 万公顷，中国为 150 万公顷。这 4 个主要国家种植了全世界 99% 的转基因作物。 近年来，我国的转基因研究取得了较大发展，并且在基因药物、转基因作物、农作物基因图与新品种等方面具有相对比较优势。但真正进入商业化生产的则较少，就农作物而言，已批准商品化的转基因作物有 4 种：棉花、西红柿、甜椒和矮牵牛花。其中，食品只有西红柿和甜椒两种，甜椒由于缺乏优良品种实际并未大面积播种，而转基因西红柿已达几万亩。;我国是世界上第二个有转基因抗虫棉花自主知识产权的国家，国内已有 12 个抗虫棉品种通过审定， 2002 年种植面积占棉花总种植面积的 40%, 累计推广面积达 2000 万亩，减少农药用量达 30% ，增加皮棉 1 亿公斤，创造经济效益 50 亿元人民币。　　 在中国的进口转基因作物中，大约有价值 10 亿美元的转基因大豆来自美国和阿根廷，总数量相当于中国全部的大豆产量。　　 据国际有关方面预测，到 20l0 年，世界转基因食物的市场总收入将达 30000 亿美元，其