第四讲蛋白质的分拣.pptVIP

4.1研究背景 我们的细胞每时每刻都在合成许许多多具有各种各样重要功能的蛋白质。它们究竟是如何越过细胞或细胞器的膜而到达正确的作用部位呢？ 1971年美国纽约洛克菲勒大学的Gunter Blobe 提出‘信号假说’，他认为从细胞分泌的蛋白质含有内在的信号，使蛋白质到达和越过膜。 1975年Gunter Blobe通过精心设计的生化实验， 报道：这种信号是具有特殊序列，构成蛋白质整体一部分的肽。在信号肽的作用下，蛋白质可以越过内质网的通道。 1980年他提出了将蛋白质分拣导 向至特定的细胞部门的普遍原理。每个蛋白质在其结构中带有标明其细胞正确定位的信息。特定的氨基酸序列决定一个蛋白将越过膜进入某个细胞器，还是整合到膜 内或从细胞输出。这些信号好比是行李上的标签，使行李能到达正确的目的地；或好比邮政编码，使信件能投递到正确的地址。这些信号序列实际上是位于蛋白质一 端或有时位于当中的氨基酸短链。 1999年Gunter Blobel因其发现蛋白质具有控制其运输和定位的内在信号的杰出贡献，获得诺贝尔生理学/医学奖。。 4.2 蛋白质分拣的基本原理 蛋白质分拣（protein targeting)：蛋白质分类并转运到正确的细胞内部位的过程 蛋白质的正确分拣的条件: 一是蛋白质中包含特殊的信号序列（signal sequence） 二是细胞器上具特定的信号识别装置（分选受体，sorting receptor）。 蛋白质的分拣信号 靶向序列（ targeting sequence)，是蛋白质分子中一小段特异的氨基酸序列，又称信号序列（signal sequence) 靶向斑块（targeting patch)，是蛋白质分子中肽链折叠使互不连续的肽段相互靠拢而构成的局部立体结构。 蛋白质在细胞内的运输形式 小泡介导:是附着在内质网上的多聚核糖体中合成的蛋白质的方式运输。 跨膜转运:是胞浆中游离的多聚核糖体中合成的蛋白质经跨膜到达线粒体或过氧化物酶体或进入细胞核。 4.3 以小泡介导的方式运输 膜泡运输的特点： 是内膜系统间的物质传递方式 运输高度定向 小泡以出芽或内吞方式生长 小泡表面具有一个笼子状的由蛋白质构成的衣被（coat）。这种衣被在运输小泡与靶细胞器的膜融合之前解体。 胞内膜泡运输沿微管或微丝运行，动力来自马达蛋白（motor proteins）。 马达蛋白有3类： 动力蛋白（dynein），可向微管负端移动； 驱动蛋白（kinesin），可牵引物质向微管的正端移动； 肌球蛋白（myosin）,可向微丝的正极运动。 COPⅠ被膜小泡(COPⅠcoated vesicle), 由外被蛋白Ⅰ(coat protein Ⅰ, COP Ⅰ )包裹的小泡。 COP Ⅰ 是一个复合体，包括：αββ’γδεζ亚基。 COPⅠ被膜小泡主要介导蛋白质从高尔基体运回内质网,包括从反面高尔基体运向顺面高尔基体,以及将蛋白质从反面高尔基体运回到内质网。 由外被蛋白Ⅱ(coat protein Ⅱ, COP Ⅱ )包裹的小泡。 COP Ⅱ是一个大的复合体，称为外被体(coatomer) ，包括 Sec23/Sec24复合体，Sec 13/31复合体，Sec 16亚基， Sec 12亚基。 这种类型的小泡介导非选择性运输, 它参与从内质网到顺面高尔基体、从顺面高尔基体到高尔基体中间膜囊、从中间膜囊到反面高尔基体的运输。 由网格蛋白包裹的小泡。 Clathrin的重链与轻链组成二聚体，3个二聚体组成三腿蛋白，再彼此交联成网状结构。 网格蛋白形成的包被中还有衔接蛋白（adaptin）。它介于网格蛋白与配体受体复合物之间，起连接作用。已知至少有4种衔接蛋白，AP1,AP2,AP3,AP4. 网格蛋白包被小泡介导从反面高尔基体网络到细胞质膜、从细胞质膜到反面高尔基网络的运输。 4.3.2. 小泡形成的条件 参与小泡出芽形成的物质有 小GTP结合蛋白 外被体 衔接蛋白 膜受体蛋白等 小泡形成要有信号与信号受体 如KDEL信号是内质网蛋白的滞留信号, 因此KDEL是COPⅠ型小泡形成的信号，而其KDEL的信号受体却是位于高尔基体的ERD2蛋白。 4.3.3 小泡形成的机制 二、衣被形成 GTP酶（coat-recruitment GTPase），为单体GTP酶（monomeric GTPase），即G蛋白（GTP结合蛋白）。 GTP酶以两种状态存在: ①同GTP结合时, 具活性状态; ②同GDP结合, 则是非活性状态。 GTP酶的活性和非活性状态的转变取决于两种蛋白: ①鸟嘌呤核苷释放蛋白(guanine-nucleotide-releasing protein, GNRP), 它催化GDP同GTP的交