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全自动毛细管DNA遗传分析仪-ABIPRISM3100的原理及应用
DNA -
ABI PRISM 3100理
( )
Field Application Specialist
Terminator Sequencing Sample Prep
1 reaction within which each terminator is labeled with a different dye
AmpliTaq FS
dATP, dCTP, dGTP, dTTP
unlabeled primer
ddCTP
+ ddATP
ddGTP
template DNA
ddTTP
Sample is purified by ethanol precipitation
Sample is purified by ethanol precipitation
to remove unincorporated ddNTP’s before loading
to remove unincorporated ddNTP’s before loading
1 Appliedbiosystems
Sanger Dideoxy Cycle Sequencing
Performed in a thermocycler with a thermostable Taq polymerase
Dye Terminator Cycle
Sequencing Step
(1)Template +Primer +Sequencing
reagents (with dye terminator)
(4) denaturation
(2) Cycle Sequencing
(5)loading CA
T
Annealing G
T
Extension
(3) Ethanol + NaOAc
precipitation Denaturation
2 Appliedbiosystems
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