人教版高中生物选修3第一章DNA重组技术的基本工具（课件 共32张PPT).ppt

精讲精练系列 专题1 基因工程 又称基因拼接技术,或重组DNA 技术。 通俗的说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向的改造生物的遗传性状。 基因工程的概念 1.DNA的基本组成单位: 脱氧核苷酸 鸟嘌呤脱氧核苷酸 腺嘌呤脱氧核苷酸 胞嘧啶脱氧核苷酸 胸腺嘧啶脱氧核苷酸 脱氧 核糖 含氮碱基 磷酸 A G C T 2.脱氧核苷酸的种类： 知识重温：DNA分子的结构 氢键 平面结构 立体结构 A T G C T A C G 磷酸二酯键 3.DNA分子的结构 1.1DNA重组技术的基本工具 专题1 基因工程 识别双链DNA 分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 主要是原核生物 4000种。 1、来源： 2、种类： 3、作用： 4、结果： 形成两种末端 一、“分子手术刀” ——限制性核酸内切酶 黏性末端 平末端 快速阅读课本第4页第二段和第5页第一段思考以下问题 限制酶识别序列的特点 中轴线两侧的DNA上碱基呈反向对称，重复排列 如：GAA TTC CCC GGG CTT AAG GGG CCC 中轴线 1、EcoRⅠ（大肠杆菌的一种限制酶）能识别GAATTC序列，并切割G和A之间的磷酸二酯键。 2、SmaⅠ能识别CCCGGG序列，并切割C和G之间的磷酸二酯键。 常用的两种限制酶 EcoRⅠ 黏性末端　　　　 黏性末端 什么叫黏性末端？ 当限制酶从识别序列的中心轴线两侧切开时，被限制酶切开的DNA的末端带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的末端叫黏性末端。 SmaⅠ 平末端　　　平末端 什么叫平末端？ 当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时，切开的DNA的末端是平整的，这样的末端叫平末端。 平末端　　　平末端 提供的物品：剪刀、写有DNA序列的红色和 绿色纸板 活动要求：用剪刀（代表EcoRⅠ）对提供的 “DNA”进行“切割” 注意：操作剪刀请注意安全！ 1、分类： ⑴ E·coli DNA连接酶 ⑵ T4 DNA连接酶 2、作用：将双链DNA片段“缝合” 起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。 二、“分子缝合针” ——DNA连接酶 可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来。 E·coli DNA连接酶或T4DNA连接酶 T4 DNA连接酶还可把平末端之间的缝隙“缝合”起来，但效率较低 氢键 T G C G A T A C 磷酸二酯键 T A C G T G C A DNA聚合酶的作用：把单个脱氧核苷酸连接到DNA片段末端。 磷酸二酯键 DNA连接酶的作用：将两个双链DNA片段连接起来。 提供的物品：活动1 “切割”的“DNA片段”、胶带。 活动要求：用胶带（代表DNA连接酶）对被限制酶切割产生的“DNA片段”进行“连接” 1.载体需要的条件： ⑴有1~多个限制酶切点（便于外源基因的插入） 　⑵对受体细胞无害 　⑶导入基因能在受体细胞中复制、表达 　⑷有某些标记基因，便于筛选 　⑴作为分子运输车——载体，如果没有切割位点将会怎样？ 　⑵霍乱菌的质粒多个限制酶切点，你会用它来做分子运输车吗？ 　⑶假如目的基因导入受体细胞后不能复制或不能转录，转基因生物能有预想的效果吗？ 　⑷目的基因有没有进入受体细胞，如何去发现？ 三、“分子运输车” ——基因进入受体细胞的载体 能复制并带着插入的目的基因一起复制 有切割位点 标记基因将来可用含青霉素的培养基鉴别。 2、基因工程中常用的载体——质粒 质粒是一种裸露的、结构简单独立于细菌拟核之外、具有自我复制能力的双链环状DNA分子。 在进行基因工程操作中,真正被用作载体的质粒都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的。 ⑴质粒 ⑵γ噬菌体的衍生物、某些动植物病毒等 2、基因工程中常用的载体 精讲精练系列