第16讲　基因工程和细胞工程.pptx

第16讲 基因工程和细胞工程;知识联网 ?; 参考答案　①DNA连接酶　②基因表达载体的构建　③将目的基因导入受体细胞　④药物　⑤基因　⑥自然界中没有　⑦全能性　⑧体细胞杂交　⑨细胞增殖　⑩动物细胞核?????化学法?????抗原;记一记 1.基因工程操作程序中的“三、三、三、二、一” (1)常考必记的三种工具:限制性核酸内切酶、DNA连接酶、载体。 (2)目的基因“三种获取方法” ①从基因文库中获取(基因组文库、cDNA文库); ②利用PCR技术扩增:其实质是在体外对目的基因进行大量复制。用PCR仪控制温度:变性(90~95 ℃)→复性(55~60 ℃)→延伸(70~75 ℃); ③通过DNA合成仪用化学方法人工合成(用于核苷酸序列已知,且核苷酸数目较少的基因)、利用mRNA反转录法合成。 (3)将目的基因导入受体细胞的“三种类型” ①导入植物细胞——农杆菌转化法(花粉管通道法、基因枪法);;②导入动物细胞——显微注射法(导入受精卵); ③导入微生物细胞——转化法。 (4)目的基因检测与鉴定的“两个水平” ? (5)基因工程操作的“一个核心”——基因表达载体的构建。;2.第二代基因工程——蛋白质工程 (1)概念 (2)基本流程;(3)蛋白质工程中为什么通过对基因操作来实现对天然蛋白质的改造? [提示] ①蛋白质具有十分复杂的空间结构,基因的结构相对简单,容易改造; ②改造后的基因可以遗传给下一代,被改造的蛋白质无法遗传。;3.必记的植物细胞工程关键点 (1)有关植物组织培养 ①植物组织培养的2个关键: ? ②植物激素的使用:细胞分裂素比例较高,促进芽分化,抑制根形成;生长素比例较高,促进根分化,抑制芽形成。 ③光照的使用:脱分化阶段不需要给予光照,再分化阶段需要给予光照,以利于叶绿素的形成。;(2)植物体细胞杂交的关键 ①酶解法——用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁。 ②促融剂——聚乙二醇。 ③杂种细胞的形成标志——新细胞壁的形成。 ④培养杂种植株的技术——植物组织培养。;4.动物细胞工程高频考点 (1)动物细胞培养的特殊条件 ①营养条件:加入动物血清、血浆等;通入氧气以满足代谢的需要;通入二氧化碳以维持培养液的pH。 ②胰蛋白酶的两次使用:首先用胰蛋白酶处理动物的器官或组织,以制备单细胞悬液;培养过程中发生接触抑制时,同样要用胰蛋白酶使细胞分散开。 ③避免杂菌污染的措施:培养液及培养用具灭菌处理,加入一定量的抗生素,定期更换培养液。;(2)动物体细胞核移植技术的关键点 ①受体细胞:去核的卵母细胞。 ②用去核的卵母细胞作为受体细胞的原因:营养丰富;体积大,易操作;含有刺激细胞核恢复分裂能力的物质。 (3)制备单克隆抗体常考点 ①3种细胞特点不同 a.B淋巴细胞:能分泌抗体,不能大量增殖。 b.骨髓瘤细胞:能大量增殖,不能分泌抗体。 c.杂交瘤细胞:既能分泌抗体,又能大量增殖。 ②2次筛选目的不同 a.第1次:获得能分泌抗体的杂交细胞。 b.第2次:获得能分泌所需特异性抗体的杂交瘤细胞。;辨一辨 ( )1.基因表达载体中的胰岛素基因可通过人肝细胞mRNA反转录获得。(2015重庆理综,6A) ( ) 2.基因表达载体的复制和胰岛素基因的表达均启动于复制原(起)点。(2015重庆理综,6B) ( ) 3.借助抗生素抗性基因可将含胰岛素基因的受体细胞筛选出来。 (2015重庆理综,6C) ( ) 4.启动子和终止密码子均在胰岛素基因的转录中起作用。(2015重庆理综,6D) ( ) 5.PEG是促细胞融合剂,可直接诱导植物细胞融合。(2016江苏单科,9A) ( ) 6.用原生质体制备人工种子,要防止细胞破裂。(2016江苏单科,9B);( ) 7.细胞核移植主要在同种动物、同种组织的细胞之间进行。(2015江苏单科,3B) ( ) 8.乳腺细胞比乳腺癌细胞更容易进行离体培养。(2015江苏单科,3A) ( ) 9.骨髓瘤细胞经免疫处理,可直接获得单克隆抗体。(2016江苏单科,9C) ( ) 10.核移植克隆的动物,其线粒体DNA来自供卵母体。(2016江苏单科,9D) 答案　1.?　2.?　3.√　4.?　5.?　6.?　7.?　8.?　9.?　10.√;总纲目录;高频命题点1　基因工程 新题速递 1.(2017吉林长春二模,38)下图表示科学家培育耐寒生物的过程,请回答: cDNA文库?抗冻蛋 白基因?更多抗冻 蛋白基因?②?受体细胞?耐寒生物 (1)从cDNA文库中获取的目的基因　　　????(有/无)启动子。实现①过程常用　　　????技术,该技术的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便合成　　　?