生物制药工艺学第9章亲和纯化技术08-04-16.ppt

第九章 亲和纯化技术 利用生物分子间的特异性结合作用的原理进行生物物质分离纯化的技术称为亲和纯化技术（Affinity purification） 技术要点 （1）找与底物专一可逆结合的配基； （2）将配基通过共价键偶联到基质； （3）配基与底物吸附； （4）洗脱目标物。 亲和纯化技术 亲和层析(Affinity chromatography) 亲和过滤（膜分离） 亲和分配（双水相萃取） 亲和反胶团萃取（反胶团萃取） 亲和沉淀（沉淀） 亲和电泳（电泳） 第一节 亲和层析(Affinity Chromatography) 利用生物大分子物质具有与某些相应的分子专一性可逆结合的特性而建立的层析技术。 适用于从成份复杂且杂质含量远大于目标物的混合物中提纯目标物。 特点 经过一次处理可得到高纯度活性物质 ； 特异性强、分离效果好、分离条件温和； 亲和吸附剂通用性较差，专用的吸附剂。 亲和吸附剂：载体—配基 在亲和层析中起可逆结合的特异性物质称为配基（Ligand）。 与配基结合的层析介质称为载体（Matrix）。 一、亲和层析的原理 （1）配基固定化：配基与载体偶联，结合成具有特异亲和性的分离介质。 （2）吸附样品：亲和层析介质选择性吸附生物活性物质. （3）样品解吸：选择适宜的条件使被吸附物活性物质解吸。 动画