家养鱼类受精生物学的研究Ⅱ．几种淡水鱼类成熟卵球的精孔器与精子入卵通路的光镜与电镜观察.pdf

维普资讯 第8卷 第2期 水生生物学集刊 V01．8．No．2 1984年5月 ACIA HYDRoBloLoGICA SINICA May，1984 家养鱼类受精生物学的研究 II．几种淡水鱼类成熟卵球的精孔器与精子入卵 通路的光镜与扫描电镜观察冰 王瑞霞 张毓人 (上 海 水 产 学 院) 傅仓生李振兰吴宜章张福顺郝宏京 (中国农业科学院原子能所) 提 要 作者对我国四种淡水养殖鱼类——团头鲂、草鱼、白鲢和花鲢卵球的精孔器作了光学显 微镜和扫描电子显微镜的比较描述，在扫描电子显微镜下观察到这几种鱼类的精子均直接经 精孔器前庭穿过精孔管进入卵内，并对精孔细胞、受精孔与精子入卵的关系以及精孔的位置 进行了讨论。 团头鲂 (MegalobramaamblycephalaYih)；草鱼 (Ctenopharyngodonidellus(C．etV．))； 白鲢 (Hypophthalmichthysmolitrix(c．ecV．))和花鲢 (Aristichthysnobilis(R．))的卵球 与其他硬骨鱼类一样均被一较厚的壳膜所紧包，在动物极的壳膜中都有一条短小的精孔 管道，是无顶体精子人卵的唯一通路，对防止多精人卵起着重要作用。关于鱼类受精纽 胞学，前人已进行过详尽的研究，但多偏重于精子入卵以后，原核的形成、结合与卵质 运动等方面的研究。而对于受精前和受精时，精子入卵的细节活动，资料颇少。国外学者 A．R．Brummett等 对底鲻精子入卵的早期进行过扫描电镜观察；K．Hosokaw~等 对 真鲷卵球的壳膜与精孔器的结构作过电子显微镜研究；国内尚无此类专题报道。朱洗和 王幽 “在论述金鱼和鳊鱼卵球成熟受精时，认为精虫不但要穿过精孔细胞，而且要穿过 这一细胞核，然后才能进入卵中。刘筠等[。认为草鱼第1V期卵，受精孔内嵌合着一个精 孔细胞，但是催青以后，即将受精的卵子，其精孔细胞已溶化消失。王幽兰等。认为，在花 鲢即将受精的卵球上，仍看到精孔细胞的存在，认为精孔细胞是精虫入卵不可缺少的通 路。傅朝君等H论述过草鱼精孔细胞的退化问题。可见迄今对硬骨鱼类成熟卵细胞是否 存在精孔细胞?精子直接由精孔管人卵?还是必经精孔细胞入卵?以及受精孔的形态结 构与部位等方面诸学者存在不同看法。由于受精孔和精子极其微小，弄清这些问题单靠 光学显微镜是有困难的，为此我们兼用了扫描电子显微镜和光学显微镜对以上问题进行 本文承王义强副教授审阅指正，光镜照片由张敏与周平凡摄制，特此致谢。 编辑部收到稿件日期：1982年l0月5日。 维普资讯 172 水 生 生 物 学 集 刊 第 8卷 了初步探讨，这不仅对鱼类受精生物学的研究(了解硬骨鱼类受精的全过程)提供基础资 料，而且对了解鱼类卵球的生理成熟过程也很有意义。 材 料 与 方 法 扫描电子显微镜研究材料是1981年6—7月间取自北京市海淀养殖场和万泉庄渔 场。首先选择性成熟的雌雄亲鱼，按体重注射一定量的催情剂后，放人流水池或环道中， 待雄鱼发情，剧烈尾追雌鱼时，将亲鱼捕起，取得雌雄生殖细胞；所得卵子以干法人工授 精，分别将授精后1秒、2秒、5秒一i分钟(每间隔5秒钟固定一次)的受精卵，先用2．5％ 戊二醛(用pH7．2的磷酸缓冲液配制)固定2—4小时或过夜，然后用上述缓冲液Ij-,,O地洗 去戊二醛 (30分钟内换新液3次)，再用1％锇酸固定2小时，以同样方法洗去锇酸。梯 度酒精 (3O——1OO％酒精)脱水，醋酸异戊酯取代(以上各步骤均在4℃下进行)。再用 导电胶将卵球粘在样品台上，HCP一2临界点干燥器干燥，HUS一5GB真空喷涂仪喷金， S-450扫描电子显微镜观察摄影，加速电压15kV。 光学显微镜研究材料取自上海市水产研究所，取材步骤