全自动活细胞影像分析测定系统INCellAnalyzer细胞水平功能测定.PDFVIP

全自動活細胞影像分析測定系統 (IN Cell Analyzer) 細胞水平功能測定及高內涵藥物篩選 1. 緣由 基於基因組學及蛋白質組學的發展及藥物篩選的需要 ，近一年來高內涵細胞及亞細 胞水平的分析技術 （High Content Screen, or HCS ）發展神速。大量的未知功能的基因 及蛋白質的出現急需能有快速 ，定量定性的功能測定的技術，並且從ＤＮＡ及蛋白質分子 的研究轉入細胞中基因及蛋白質的功能研究 。藥物開發中也急需細胞水平的篩選來得到更 多信息從而加快及降低藥物開發的成本。全自動活細胞影像分析系統就是這一技術的代 表。 從基因組及蛋白質組的研究將得到一系列與疾病有關的特定基因或蛋白 ，利用全自 動活細胞影像分析測定系統 ，可快速定量的觀察到它們在細胞內的功能及作用機制，從而 為疾病的產生 ，預防及治療提供依據，完成從基因，蛋白到細胞生物體內的完整資訊。 全自動活細胞影像分析測定系統結合高內涵細胞水平分析技術是近年來在藥物篩選 中應用最廣的技術 。例如：治療SARS 中藥篩選 ，可透過全自動活細胞影像分析測定系 統結合高內涵細胞水平分析技術篩選出對非典型肺炎不同病理環節和改善其臨床症狀有效 的中成藥 。 藥物篩選急需有新的方 法來降低成本 ，提高效率，讓無效的候選藥物儘快在臨床測 定前就被剔除，而在細胞水平層面的篩選完全符合這些要求。觀察候選藥物在單個細胞中 的活動情景能清晰的告訴我們藥物能否進入細胞 ，在細胞內如何分佈，候選藥物對細胞的 作用如何 ，對細胞的毒性如何等多重資訊。 2. IN Cell Analyzer 活細胞圖像分析系統 技術包括儀器 ，試劑及分析軟體三部分。 (1) 儀器 儀器包括一個自動升降平台 ，高解析度CCD 相機 ，鐳射自動聚焦系統以滿足多螢光成像。對 於一個常規雙色成像 ，可在5 分鐘內或15 分鐘內完成96 孔板或384 孔板樣品分析。IN Cell Analyzer 1000 提供多種圖像軟體後處理應用功能 。該系統也是一個開放平台，可容納多種實 驗室自動系統 ，同時也可升級，增加如溫度控制或線上加樣等功能。 系統可提供多種圖像分析功能軟體。通過調整用戶自定義參數，操作者可採用專一分析途經 追蹤多種細胞變化過程 。包括胞內關鍵信號分子轉位元、轉移因數、活化、受體內源化、鈣 離子通道、酶活化、細胞凋亡和細胞週期，以及神經突生長。先進的圖像分析技術可採用由 多通道採集的圖像彙集為四色圖像。逐一細胞分析可用於觀察細胞群的整體特性 ，從而避免 由於使用不同細胞群的平均反應值而帶來的信號衰減 。 ● 實驗台儀器 安裝簡便 ，對實驗室環境無特殊要求 ● 有4× ，10× ，20× ，40×物鏡 ● 100 瓦氙燈，亮度高，產熱低，壽命長 ● 可冷卻到 -30℃高質量數碼相機高靈敏度 ，背景噪音低 ● 高解析度 12bit ，圖像解析度1392×1040 ● 自動位移裝置 ，快速並精確地移動細胞培養板或載玻片 ● 鐳射主導的自動聚焦快速 ，小於150 毫秒 ● 自動濾光片轉換盤 ，自由轉換各種波長的激發及散射濾光片 ● 可安裝溫度控制系統 ，研究活細胞，動力學測定。溫度控制範圍25℃～42℃ ● 可加裝自動加樣系統 ，可加藥品或化合物1～100ml ，並有自動清洗裝置 ● 可加白光系統 ，無需標記，高解析度的細胞形態測定 ● 先進的圖像分析，高效且使用簡易的分析軟體，多視野圖像動力學分析模式 (2) 試劑 細胞圖像分析的工具細胞測定細胞株 ，報告基因系統和試劑 多種GFP 信號傳導細胞株 ，利用GFP(源於Aequorea Victoria) 建構確證的穩定細胞株和表達 載體 。 ● GFP-MAKAP-k2 Assay P38 途徑 ● GFP-Rac-1 Assay 胞質分裂 ，遷移，轉換 ● GFP-PLCδPH domain As