rho激酶抑制剂y27632促进大鼠成骨细胞早期分化.pdfVIP

ＩＳＳＮ　 １００７⁃７６２６ 中国生物化学与分子生物学报　 ｈｔｔｐ：／ ／ ｃｊｂｍｂ．ｂｊｍｕ．ｅｄｕ．ｃｎ ２０１７年７月 ＣＮ　 １１⁃３８７０／ Ｑ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ ３３（７）：７４３～７４８ ·研究简报· ＤＯＩ：１０１３８６５／ ｊ．ｃｎｋｉ．ｃｊｂｍｂ Ｒｈｏ激酶抑制剂Ｙ⁃２７６３２促进大鼠成骨细胞早期分化 金紫洋，　 唐　 强，　 杜　 宇，　 杜文颖，　 来　 敏∗ （江苏师范大学生命科学学院，江苏徐州　 ２２１１１６） 摘要　 已知Ｒｈｏ激酶抑制剂可调控细胞骨架重建，激活相关转录因子，进而促进细胞分化。 然 而，关于Ｒｈｏ激酶抑制剂对细胞骨架和成骨细胞分化的影响及两者之间关系尚未见报道。 本研 究旨在阐明Ｒｈｏ激酶抑制剂Ｙ⁃２７６３２ 调控细胞骨架重建，促进成骨分化。 取新生ＳＤ 大鼠头盖 骨组织体外培养细胞传至第３代，给予Ｒｈｏ激酶抑制剂Ｙ⁃２７６３２ 进行干预。 采用罗丹明标记的 鬼笔环肽对细胞骨架进行细胞化学染色。 结果显示，培养 １ ｄ 和２ ｄ，Ｒｈｏ 激酶抑制剂Ｙ⁃２７６３２ 处理的细胞呈现多角形，并伴有部分伪足形成。 细胞培养４ ｄ和７ ｄ，Ｙ⁃２７６３２ 处理的细胞碱性 磷酸酶（ａｌｋａｌｉｎｅ ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ，ＡＬＰ）活性明显增加（Ｐ ＜００１）。 实时定量ＰＣＲ揭示，加 Ｙ⁃２７６３２ 处理细胞的骨分化相关基因Ｒｕｎｘ２、Ａｌｐ、β⁃ｃａｔｅｎｉｎ（β⁃ｃａｔ）、ｏｓｔｅｏｐｏｎｔｉｎ（Ｏｐｎ）的ｍＲＮＡ表达水平均 显著高于对照细胞（Ｐ ＜００５ 或Ｐ ＜００１）。 以上结果证明，Ｒｈｏ 激酶抑制剂Ｙ⁃２７６３２ 能够影响 大鼠成骨细胞的形态，并有促进其分化作用。 本研究为骨代谢疾病及组织工程的研究提供了新 的线索和启示。 关键词　 Ｒｈｏ激酶抑制剂Ｙ⁃２７６３２；成骨细胞；分化；形态 中图分类号　 Ｑ２５ Ｒｈｏ Ｋｉｎａｓｅｓ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ Ｙ⁃２７６３２ Ｐｒｏｍｏｔｅｓ ｔｈｅ Ｅａｒｌｙ Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｏｆ Ｒａｔ Ｏｓｔｅｏｂｌａｓｔｓ ＪＩＮ Ｚｉ⁃Ｙａｎｇ，ＴＡＮＧ Ｑｉａｎｇ，ＤＵ Ｙｕ，ＤＵ Ｗｅｎ⁃Ｙｉｎｇ，ＬＡＩ Ｍｉｎ∗ （Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，ＪｉａｎｇｓｕＮｏｒｍａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｘｕｚｈｏｕ２２１１１６，Ｊｉａｎｇｓｕ，Ｃｈｉｎａ） 　 　 骨骼在个体生长发育过程中不断地进行重构和 ２７６３２是否能通过调控细胞骨架重建促进成骨细胞 修复，而其生理平衡主要通过成骨细胞介导的骨形 的分化，目前尚不清楚。 成和破骨细胞介导的骨吸收进行调节。 目前，大多 本文旨在通过Ｒｈｏ激酶抑制剂Ｙ⁃２７６３２对成骨 数骨科疾病是由于骨形成和骨吸收的不平衡所 细胞进行干预，从细胞和分子水平上研究其对细胞 ［１］ 形态和分化的影响，以期为骨代谢疾病的研究及组 致 。 成骨细胞是当前骨组织工程和骨类疾病治 疗相关研究的重要细胞之一。 织工程的发展提供相关理论基础。 Ｒｈｏ／ Ｒｈｏ激酶（ＲＯＣＫ）信号通路参与调控多种 细胞生命活动，ＲＯＣＫ是Ｒｈｏ蛋白下游的效应分子， ＲＯＣＫ活化后可介导其下游一系列底物磷酸化和脱 收稿日期：２０１７⁃０１⁃２５；修回日期：２０１７⁃０４⁃１９；接受日期：２０１７⁃０５⁃２３ 江苏省大学生实践创新训练计划重点项目（２０１５１０３２００５４Ｚ） ；江苏