中国药典2010年版--显微鉴别法.pptVIP

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中国药典2010年版--显微鉴别法

显微鉴别法 中药材及中药制剂的显微鉴别 显微鉴别系指用显微镜对药材的(饮片)切片、粉末、解离组织或表面制片及含药材粉末的制剂中药材的组织、细胞或内含物等特征进行鉴别的一种方法。鉴别时选择有代表性的供试品,根据各品种鉴别项的规定制片。制剂根据不同剂型适当处理后制片。 光学显微镜的构造 1.机械部分、 2.照明部分、 3.光学放大部分 1.机械部分: 1)、镜座:基座,稳定和支持整个镜体。 2)、镜柱:支持镜臂。 3)、镜臂:支持镜筒,拿镜时握持此臂。 4)、镜筒: 5)、物镜转换器:物镜孔,可安装不同放大率的物镜。 6)、镜台: 7)、调节器:分粗调和细调,细调在一圈范围内调 2、照明部分: 1)、反光镜 (光源):强时用平光镜,弱时用凹面镜。 2)、聚光器 3)、光圈光阑。 3、光学放大部分 1)、目镜:5X,10X,15X,内可放测微尺 2)、物镜:低倍,镜筒短,筒径粗,5X。 高倍,镜筒长,筒径细,40X,45X。 油镜:镜筒最长,80X,85X。 光学显微镜的使用 (一)、低倍镜的用法 1)、取镜:注意小心平稳轻放。 2)、准备: 3)、对光: 4)、上片:注意有盖玻片的向上,注意取盖玻片时的拿法。 5)、调节物距:注意先把低倍镜调至距玻片0.5厘米的样子——粗调——然后缓慢使物镜上调,直至视野里出现可见物。 注意两个要领:一是慢,二是距离只允许调大不允许调小。 标本片与物象移动方向相反。 如果调过了必须从头再来一次,直至视野里出现物象。 (二)、高倍镜的用法 用高倍镜的方法须在低倍镜取像的情况下,换高倍镜头,调节微调旋钮直至看清物象。调节范围在一圈以内。 显微镜的维护 ①取镜时应一手紧握镜臂,一手平托镜座。安放好的显微镜就不要随意搬动。 ②使用前后,检查镜头和镜体,严禁随意拆卸。 ③保持清洁,避免灰尘和潮湿。避免阳光直射。远离挥发性和腐蚀性化学试剂。 ④镜筒下降时,眼睛一定要看着物镜。 ⑤使用显微镜时,一定要稳重、谨慎、轻拿轻放。显微镜不要放在实验桌的边缘,以防跌落地面。 ⑥实验完毕,把显微镜擦拭干净。再转动镜头转换器,把两个物镜偏到两旁。最后把显微镜放进镜箱里,送回原处保存。 显微测微器的使用 显微测微尺是用来测量细胞在显微镜下长度的工具,由目镜测微尺和镜台测微尺组成,两尺配合使用。 1. 目镜测微尺 放在目镜筒内的一种标尺,为一个直径18`22mm的圆形玻璃片, 中央刻有精确等距离的平行线刻度,常为50格或100格 2.载物台测微尺 在特制的载玻片中央粘贴一刻有精细尺度的圆形玻片。通常 将长1mm(或2mm)精确等分成100(或200)小格,每1小格长为10um,用以标定目镜 测微尺 3.目镜测微尺的标定 用以确定使用同一显微镜 及特定倍数的物镜、目镜和镜 筒长度时,目镜测微尺上每一格所代表的长度。 取载物台测微尺置显微镜载物台上,在高倍物镜(或低倍物镜)下,将测微尺刻度移至视野中央。将目镜测微尺(正面向上)放入 目镜镜筒内,旋转目镜,并移动载物台测微尺,使目镜测微尺的“0” 刻度线与载物台测微尺的某刻度线相重合,然后再找第二条重合刻度线,根据两条重合线间两重合线间两种测微尺的小格数,计算出目镜测微尺每一小格在该物镜条件下相当的长度(um), 如目镜测微尺77小格(0~77) 与载物台 测微尺的30小格(0.7~1.0)相当,已知载物台测微尺每一小格的长度为10um。目镜测微尺每一小格长度为:10um*30/77=3.8um。 当测定时要用不同的放大倍数时,应分别标定。 4.测量方法 将需测量的目的物显微制片置显微镜载物台上,用目镜测微尺测量目的物的小格数,乘以上述每一小格的微米数。通常是在高倍镜下测量,但欲测量较长的目的物,如纤维、导管、非腺毛等的长度时,需在低倍镜下测量。 记录最大值与最小值(um),允许有小量数值略高或略低于规定。 药材显微制片 1、横切片或纵切片制片 取供试品欲观察部位,经软化处理后,用徒手或滑走切片法,切成10~20μm的薄片,必要时可包埋后切片。选取平整的薄片置载玻片上,根据观察对象不同,滴加甘油醋酸试液、水合氯醛试液或其他试液1~2滴,盖上盖玻片。必要时滴加水合氯醛试液后,在酒精灯上加热透化,并滴加甘油乙醇试液或稀甘油,盖上盖玻片。 粉末制片 供试品粉末过四号筛,挑取少许置载玻片上,滴加甘油醋酸试液、水合氯醛试液或其他适宜的试液,盖上盖玻片。必要时,按上法加热透化。 表

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