改性乳清蛋白磁性纳米粒子药物载体的制备及载药性研究.pdf

中文摘要 改性乳清蛋白磁性纳米粒子药物载体的制备及载药性研究 本科题来源于中国科技部的支撑项目 《乳清蛋白应用技术研究与开发》 2013BAD18B07 （ ）与省科技攻关项目《林蛙残体胶原蛋白多肽的结构修饰及稳 定性关键技术研究》（3D516CX84071）。 WPI 分离乳清蛋白 （ ）营养价值极高，在食品及医学领域应用较为广泛，并 且具有相当大潜力应用在药物载体领域。为了改善抗癌药物临床应用难的一系列 复杂症状，如副作用大，传递效率低等，本文制备了一种基于改性乳清蛋白磁性 纳米粒子 （WMNP）的新型药物载体系统。并且为了提高乳清蛋白 （WP）的药 D- WP Fe O 物负载效率，使用 木糖通过糖基化反应与 进行结合。磁性 3 4 纳米粒子 则是作为此药物载体系统提供靶向性，可以在肿瘤部位达到靶向释放从，而使抗 肿瘤药物提高传递效率。最后，将紫杉醇作为模型药物，利用微胶囊的形式将其 包覆在本文所制备的新型药物载体中，得到具有生物相容性和靶向传递功能的紫 杉醇微胶囊。本文主要从以下几个方面进行研究并得出结论： 以WPI 和D-木糖、葡萄糖、麦芽糖为糖基化反应原料，以盐酸盐酸阿霉素 和紫杉醇作为模型药物，研究了糖基化反应中糖的种类以选择的药物种类对乳清 蛋白载药性与释药性的影响，主要是对药物的负载效率进行测定。结果表明：当 D-木糖作为糖基化原料，以疏水性抗肿瘤药物紫杉醇作为模型药物时，乳清蛋白 糖基化后的药物负载率均高于空白与其他糖，并且负载率高达93%。当葡萄糖或 D- 者 木糖为糖基，紫杉醇为模型药物的时候，药物从乳清蛋白载体中可以持续 的稳定释放。 并且分别以载药性、糖基化度以及糖基化产物的理化性质作为判定指标，糖 基化度包括糖基化溶液的浊度、褐变程度、中间产物、粒径分布、Zeta 电位等， 理化性质则包括起泡性、流变特性、粘度、表面疏水性等，设计了一系列单因素 实验以及正交实验筛选最优糖基化反应的条件，进而为工业化生产提供基础数 据。最后由Pearson 函数公式计算得知，载药性与糖基化度的相关性最高，相关 I 系数P＞0.99，其次是载药性与表面疏水性的相关系数P＞0.98，说明其相关性较 pH 8 120min 高，最后确定最佳糖基化条件为初始 值为 、反应时间为 、反应温度 为70℃，质量比为2:1。 CD Zeta SEM 圆二色谱 （ ）、 电位以及扫描电镜 （ ）等结果表明，糖基化的反 应发生并且减少了乳清蛋白中β-乳球蛋白等的含量，改变了其原有的紧密结构， 使乳清蛋白的结构变得疏松无序，可以为模型药物提供更好的负载环境，为后续 的微胶囊化做铺垫。（SEM）测试表明，糖基化溶液的表观形貌光滑细腻，具有 良好的应用前景。 利用共沉淀法制备Fe O 磁性纳米粒子并对其进行表面功能化，并进行一系 3 4 列表征。磁滞回线结果显示，本文制备的磁性纳米粒子的磁饱和度为70.7emu/g， 说明Fe O 磁性纳米粒子具有超顺磁性。利用X 射线衍射 （XRD）测量了其晶体 3 4 类型，证明了本实验制备的纳米粒子为氧化铁的立体衍射峰，粒径大小为19nm 左右。并且利用红外光谱 （FT-IR）对氨基化的Fe O 磁性纳米粒子与未氨基化 3 4 的粒子比较，在A-Fe O 纳米粒子的谱图上发现了在 1620cm-1和1117cm-1处的 3 4 吸收峰归则因于N–H 弯曲和C–N 伸缩模式，证明成功的进行了将氨基嫁接在 Fe O 磁性纳米粒子表面，此结论在抗肿瘤