化妆品中7种禁用物质检测方法公布(化妆品中二乙基己基丁酰).doc

附件4： 化妆品中二乙基己基丁酰胺基三嗪酮的检测方法 1 适用范围 本方法规定了采用高效液相色谱-紫外法测定化妆品中二乙基己基丁酰胺基三嗪酮（CAS： 154702-15-5）的方法。 本方法适用于膏霜、乳、液类化妆品中二乙基己基丁酰胺基三嗪酮含量的测定。暂无实验数据支持本方法适用于粉类、蜡质类化妆品。 2 方法提要 样品在经过提取后，用高效液相色谱仪分离，紫外检测器检测，根据保留时间定性，峰面积定量，以标准曲线法计算含量。本方法二乙基己基丁酰胺基三嗪酮的检出限为0.0006(g，定量下限为0.0016(g，取0.1g样品时的检出浓度为0.006%，最低定量浓度为0.016%。 3 试剂和材料 3.1 甲醇，色谱纯。 3.2 超纯水。 3.3二乙基己基丁酰胺基三嗪酮，纯度＞99.0%。 3.4二乙基己基丁酰胺基三嗪酮标准储备液[( （二乙基己基丁酰胺基三嗪酮） = 1.0 g/L]：取二乙基己基丁酰胺基三嗪酮（3.3）约0.1g，精确至0.0001g，置于10 mL容量瓶中，用甲醇（3.1）溶解并定容至刻度，摇匀，配成质量浓度为1.0 g/L的标准储备溶液。 3.5系列浓度二乙基己基丁酰胺基三嗪酮标准溶液：精密量取标准储备溶液（3.4）0.1 mL于100 mL容量瓶中，0.1、0.2 mL于20 mL容量瓶中，0.15、0.25、0.4 mL及0.5 mL于5 mL容量瓶中，用甲醇（3.1）稀释至刻度，摇匀。此时溶液中二乙基己基丁酰胺基三嗪酮浓度分别为1.0、5.0、10.0、30.0、50.0、80.0和100.0 (g/mL。 4 仪器 4.1 高效液相色谱仪，具有紫外检测器。 4.2 超声波清洗器。 4.3 离心机。 4.4 分析天平：感量0.0001g。 5 测定步骤 5.1 样品处理 准确称取样品约0.1g，精确至0.0001g，置于50 mL具塞比色管中，加入甲醇（3.1）约20 mL，涡旋3 min，振摇，超声（功率：500W）提取30 min，静置待其冷却到室温，用甲醇定容至25ml刻度，必要时4500rpm离心5min，精密量取上清液1 mL于10 mL容量瓶中，用甲醇（3.1）稀释至刻度，摇匀，过0.45 (m滤膜，滤液作为待测样液，备用。 5.2 色谱条件 色谱柱：C18 柱，250 mm×4.6mm，5 (m ； 流动相：甲醇 + 水 = 98 + 2； 流速：1.0 mL/min； 检测波长：307 nm； 柱温：30℃； 进样量：20(L。 5.3 测定 在5.2色谱条件下，取系列浓度二乙基己基丁酰胺基三嗪酮标准溶液（3.5）分别进样，进行液相色谱分析，以标准溶液浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，进行线性回归，建立标准曲线，得到回归方程。取“5.1”项下处理得到的待测溶液进样，根据测定成分的峰面积，利用回归方程计算二乙基己基丁酰胺基三嗪酮的质量浓度。按“6计算”，计算样品中二乙基己基丁酰胺基三嗪酮的含量。 5.4 平行实验 按以上步骤操作，对同一样品独立进行测定获得的两次独立测试结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。 6 计算 D(V ( （二乙基己基丁酰胺基三嗪酮）= ————× m×106 式中：(（二乙基己基丁酰胺基三嗪酮）—— 化妆品中二乙基己基丁酰胺基三嗪酮的含量， %； m —— 样品取样量，g； ( ——利用回归方程计算得到待测样液中二乙基己基丁酰胺基三嗪酮的质量浓度，(g/mL； V —— 样品定容体积，mL； D —— 稀释倍数。 7 精密度与准确度 多家实验室验证的平均回收率为93.8%-113%，相对标准偏差小于4%（n=6）。 8 色谱图 二乙基己基丁酰胺基三嗪酮标准溶液（50 (g/mL）色谱图 色谱峰1： 二乙基己基丁酰胺基三嗪酮（TR = 12.237 min）