3 流感快速诊断方法及试剂盒技术指标参数综述.pptVIP

* 实验步骤 1.将提取液全部倒入提取试管中，轻轻摇动溶解冻干物 2.将标本拭子置于提取管中，用拭子头部抵住试管底部或侧壁至少旋转拭子3次 3.充分旋转拭子，挤压出其头部全部水分后取出，按危险品处理规程废弃拭子 4.照检测条上箭头标记将其插入提取试管内，检测未结束前请勿触摸或移动检测条 5.在10分钟内判读结果，一些阳性结果可能会提前出现 * 结果判定 10分钟内出现粉红/红色检测线（位于蓝色质控线上或下）和蓝色质控线，则结果阳性，说明存在A型或B型流感病毒感染。 箭头朝下拿着检测条。 1、如果红线在质控线上方，表示A型流感病毒检测阳性 2、如果红线在质控线下方，表示B型流感病毒检测阳性 3、10分钟内仅出现蓝色质控线，则A型和B型流感检测阴性，判断无流感病毒感染 阳性 阴性 无效 * 北京阿斯可来FluA和FluB快速检测试剂盒 * 检测程序概述 * 结果分析 阳性：在检测区（T)和对照区（C）个出现一条红色色带。 阴性：只在C区位置只有一红色色带出现。 检测无效：无色带出现或仅在检测线位置出现一条红色带。 阳性结果 阴性结果 * 流感快速诊断方法及试剂盒技术指标参数综述 高荣保 中国疾病预防控制中心 病毒病预防控制所 国家流感中心 * 背 景 流感的爆发和流行正威胁着全球公众的健康，特别是近期在全球多个国家出现多次人感染A/H5N1禽流感病毒以后，这预示着甲型流感病毒出现流行爆发的可能。因此WHO正在强调加强流感的监测的工作，并强调要提高实验室检测诊断流感的能力，以及要及早的发现流行病毒株。 * 流感病毒感染不能仅仅依靠临床症状进行诊断，因为依靠临床特征很难区分呼吸道合胞病毒、副流感病毒、腺病毒、冠状病毒、偏肺病毒以及其他相关呼吸道病毒引起的流感样病例。因此流感病毒的实验室检测给临床及时地诊断和治疗提供信息，此外，对于公共健康反应和政府应急处理也提供依据。 * 实验室检测 抗原检测：快速诊断检测（快诊）、 IFA、HA、ELISA 病毒分离：细胞、鸡胚 核酸检测：RT-PCR、Real-time RT-PCR、NASBA、MDD 血清学检测：HI、ELISA、IFA、SRH、MN * Comparison of diagnostic techniques for human influenza virus infection * 实验室检测决策 两大挑战： 流感监测中对新病毒株的确认（如H5N1） 在不同的流行阶段诊断策略的决定 * 流行早期阶段 重点在于控制和预防，此时高灵敏度的检测手段（如流行株特异性核酸检测）是优先被选择的，目的在于发现起始病例或病例群，以便能够及时地进行抗病毒治疗和制定相应的预防策略。 实验室检测决策 * 流感已经广泛流行期间 此时的重点在于临床病例的确认，进而防止在医院内进一步传播扩散，因而此时实验室检测可以采用免疫荧光、快速抗原检测（快诊）等技术进行病例诊断，并且在有可能的情况下进行耐药性检测。 实验室检测决策 * 快诊是WHO推荐使用的快速检测方法之一 * 快诊检测 基于流感病毒抗原检测的快速诊断方法 胶体金法 免疫印迹ELISA （Dot ELISA）法 NP抗原 M抗原 双抗体夹心法 * 胶体金法原理 * 斑点-ELISA（Dot-ELISA）的特点 以吸附蛋白质能力很强的硝酸纤维素膜为固相载体； 底物经酶反应后形成有色沉淀，使固相膜染色。 * * 快诊方法的特点 操作简单 快速（30min） 结果容易判断和解释 无仪器设备需求，可用于疫情现场检测 FluA和FluB 不能进行亚型的鉴别 * 标本及要求 鼻拭子 鼻咽拭子 鼻咽部吸取物 鼻洗液 咽拭子 支气管吸取物 支气管灌洗液 * 标本在临床发病的早期采集（96小时内）。 成人采集鼻、咽拭子，并且在采集鼻拭子时，要尽可能的深入采集。 三岁以下的儿童在保证安全的情况下采集鼻咽部分泌物。 标本及要求 * 快诊的应用价值 感染病例的处理：辅助流感病例的临床治疗策略和医院处理方案的制定。 爆发疫情的处理：有助于对爆发疫情的预防控制制度的建立。 公共健康：在流感爆发期间，对于公共场所（如商业区、旅游区）的人群健康，快速诊断将提供有效的信息以供控制方案的制定，提供有效的公共健康建议。 * 快诊的应用价值 监测：为社会公众提供流感活动情况的“早期预警”系统.在一些国家快速检测已经被应用流感的监测形成制度，被用于病毒分离前的标本筛选。但是WHO要求对流感进行抗原分析，不推荐把快速检测作为监测的单一手段。 * 快诊检测的局限性 在季节性流感或爆发流感疫情开始阶段，阴性结果不能作为临床治疗或控制策略的依据，由于阴性结