食品中有害有毒物质 〖精品课件〗一知识讲稿.pptVIP

2. 色谱条件 色谱柱:HP-5MS石英毛细管柱 氮气:1ml/min 柱温:60℃(保持0.5min),以10℃/min,至280℃(保持20min) 进样口温度:260℃ 检测器ECD温度:280℃ 进样方式:不分流 8.2 兽药 在食用动物饲养过程中广泛使用药物,会造成药物残留在可食用产品中。动物性食品的药物残留会对人类健康产生影响。 兽药的检测方法包括:筛查,检测和确认。 筛查方法是就某种基质中一定浓度的某种药物做出阳性或阴性反应的试验方法:微生物抑制试验(用于对大批量样品进行抗生素筛查)、放射和酶免疫快速测试盒(对指定药物的筛查)。只能分类,不能确认是某种具体的化合物。 如果样品中确实存在违规的药物残留,就需要使用其它的分析方法来确认:薄层色谱法、GC、HPLC、GC/MS和HPLC/MS。 8.2.1 β-兴奋剂的残留分析 β-激动剂,在化学上属苯乙醇胺,为儿茶酚胺、肾上腺素和去甲肾上腺素的化学类似物。一般可分为含取代基的苯胺型(如克伦特罗)和苯酚型(如沙丁胺醇)两大类。 它能与肌体绝大多数组织细胞膜上β-受体发生作用。 某些合成的β-激动剂,当以高剂量饲养动物时,会导致营养物质从脂肪组织向肌肉组织的转移,使畜禽瘦肉增加。由于这种用法造成的可是用组织中的药物残留在毒理学等方面的种种问题,致使许多国家禁止在使用动物中使用该类药物。 测定方法 检测β-兴奋剂的样品种类很多,有饲料、尿、血浆、内脏(肝、肾)、肌肉、毛发、视网膜等。其中最能积累β-兴奋剂的是内脏、视网膜。所以,在上述样品中,检测是否违法使用β-兴奋剂作为生长促进剂的合适样品是肝脏。另外,尿样本前处理较简单,可实现快速检测。 样品的前处理 样品的前处理包括样品提取、酶解(酸解)、净化,如果采用GC检测,还增加衍生化步骤。 β-兴奋剂检测进行酸解、酶解的必要性:因为β-兴奋剂在样品中往往会与其它成分形成结合物,如在葡糖苷酸酶、硫酸酯蛋白相结合,所以样品在提取氏要用酸或酶水解。 酶解、酸解的条件选择:酶的品种、酶解的酶用量、酶解时间 提取 提取的方法有液液萃取法、固相萃取法、超临界提取法。 净化 最常用的净化手段是固相萃取法(SPE),也有人采用免疫亲和色谱法、液液净化法。 免疫亲和色谱法:用实验动物生产出特异性抗体,抗体纯化后被结合到琼脂糖胶上制成柱,样品上柱后, β-兴奋剂就与这些柱上的抗体结合在一起而保留下来,然后再用溶剂洗脱。现在已有商品化的可重复使用的IAC柱。 衍生化 GC/MS、GC/FTIR确证前,采用衍生化技术以提高检测灵敏度。最常用的衍生化试剂有:三甲基硅烷(TMS)、环状二甲基硅烷吗啉(DMS)。另外还有碳酰氯(COCl2)、甲基硼酸(MBA)、五氟一丙酐。 2. 检测 GC/MS 这是β-兴奋剂检测非常有效、灵敏、准确的手段,电离方式有电子轰击EI、化学离子化CI两种方式。 采用TMS作衍生化试剂、EI电离方式电离某些β-兴奋剂的碎片如下: 克伦特罗:86,262,243,333,277,187 沙丁胺醇:86,369,350,440,384,294 特布他林:86,356,336,426,370,280 HPLC 常用的检测器有紫外(UV)、荧光、电化学等。 免疫分析法 放射免疫分析法、酶免疫分析法 优点:一次可处理多个样品、有商品化试剂盒供应,检测灵敏度高 薄层色谱法 HPLC/MS GC/FTIR 合成的β-激动剂 瘦肉精——克伦特罗;盐酸克伦特罗;盐酸双氯醇胺;克喘素;氨哮素;氨必妥;氨双氯喘通;氨双氯醇胺。 化学名为“2-「(叔丁氨基)甲基」－4-氨基-3,5-二氯苯甲醇盐酸盐”,是一种从天然儿茶酚胺衍生合成的化合物;也称羟甲叔丁肾上腺素,?是一种强效兴奋剂。 ??? 上世纪80年代初,美国脂胺公司研究人员意外地发现,将一定量的盐酸克伦特罗加入饲料中,能够改变营养物质的代谢途径,促进动物肌肉特别是骨胳肌蛋白质的合成,同时抑制脂肪合成,从而促进动物生长,增加瘦肉率。根据试验得出,在饲料中添加适量的盐酸克伦特罗,可以提高饲料转化率、生长速率、瘦肉相对增加10％以上,于是这项技术开始在养殖业中大行其道。 瘦肉精用于养殖的发现 作用机理 它的主要作用机理是作为一种强效激动剂,选择性的作用于肾上腺素β2受体上,激活腺苷酸环化酶(cAMP),使环磷腺苷增加,加强脂肪分解,促进蛋白质合成,实现动物营养再分配,故又将瘦肉精称作“生长促进剂(growth promoter)”和营养“重分配剂(repartitioning agent)”。 为提高猪肉的瘦肉率,瘦肉精作为饲料添加剂,使用剂量是人用药剂量的10倍以上。它用量大、使用的时间长、代谢慢,所以屠