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2013中图版选修1第三章第1节《酶的制备及活力测定》ppt课件[www.1kejian.com]
第三章 酶的制备及应用;第1节 酶的制备及活力测定;学习导航
1.研究酶的存在及提取方法。[重点]
2.尝试利用酶活力测定的一般原理和方法。 [难点];;判一判
(1)人体内、参与物质分解的酶都可以在分泌物中提取。(×)
(2)高温、低温、过酸和过碱等环境条件都能改变酶的空间结构,导致酶变性失活。(×)
(3)新采摘的甜玉米放在沸水中浸泡后,可使甜味保持的时间长些。(√)
(4)萨姆纳第一次证明了脲酶是蛋白质。(√);二、酶的活力及测定方法
1.酶的活力:以单位时间内_______________或者在单位时间内_______________来表示。
2.酶活力的测定
(1)方法:利用______________进行比色。;(2)实例
①植物淀粉酶的制备及活力测定;钝化酶的活性使反应终止;想一想
进行酶活力测定时,出现了“恒温处理”、“沸水加热”、“钝化处理”,是否矛盾?各有什么目的呢?
【提示】 不矛盾。恒温处理是为酶促反应提供必要的温度条件,与之形成对照的是经沸水浴加热变性失活的酶液,而钝化处理是使反应后的酶失活,使反应终止。;②过氧化氢酶粗酶液的制备及活力测定
a.制备过氧化氢酶粗酶液
以新鲜动物肝脏、马铃薯块茎或萝卜块根为材料,经过切碎、研磨、_____,取_______即可得到过氧化氢酶粗酶液。;b.分光光度法测定过氧化氢酶的活力
在过氧化氢酶存在时,过氧化氢将_________氧化生成_____色产物。待酶反应终止后,过滤,取滤液适当稀释,在波长_____ nm处测吸光值,计算出过氧化氢酶的活力。;c.高锰酸钾滴定法测定过氧化氢酶的活力
过氧化氢酶可以催化H2O2分解为水和氧。如果在反应系统中加入适当过量的过氧化氢溶液,经酶促反应后,在酸性条件下,用标准高锰酸钾溶液滴定多余的______,反应如下:
5H2O2+2KMnO4+4H2SO4―→5O2+2KHSO4+8H2O+2MnSO4;H2O2的量;; H2O2酶粗酶液的制备过程中叙述错误的是( )
A.以新鲜动物肝脏、马铃薯块茎或萝卜块根为材料
B.材料需要破碎、过滤和离心处理
C.取上清液即可得到粗酶液
D.粗酶液需要钝化处理保存;【解析】 H2O2酶分布于很多组织细胞中,可有效地去除H2O2的危害,它属于细胞内的酶,所以要进行破碎或研磨,然后过滤、离心。但钝化处理???使酶失去活性的方法,不是保存方法。
【答案】 D;互动探究
(1)如果换成胰蛋白酶的制备,具体方法又是怎样?
(2)从哪些方面考虑酶液的保存?
【提示】 (1)细胞外的酶可直接从分泌物中提取。
(2)酶液保存应考虑影响酶活性的因素,如低温、适宜pH等条件。;要点二 影响酶活力的因素
1.温度
酶活力随温度的变化而变化的趋势可用图示表示:;(1)温度从t1到t时,随着温度的升高,酶活力逐渐增强。
(2)温度从t到t2时,随着温度的升高,酶活力逐渐降低。
(3)温度高于t2时,酶活力全部丧失。
(4)t3、t4条件下,酶活力相同。
(5)t为最适温度,即在该温度时,酶的活力最强。;2.pH
每种酶都有一定的最适pH范围。例如:过氧化氢酶最适pH范围为6.8~7.3。过酸、过碱都会使酶发生不可逆失活。;3.酶的激活剂
有时加入酶的激活剂可以提高酶活力。
4.酶的抑制剂
加入酶的抑制剂后可以降低酶活力,甚至使酶失去活力。
特别提醒 酶活力的高低受温度、pH、激活剂等多种因素的影响,所以酶的提取一般选择在低温和适合的pH下进行,有时还要加入酶的激活剂以提高酶活力。; 胰蛋白酶作用于一定量的某种物质(底物),温度保持在37 ℃,pH保持在最适值,生成物量与反应时间的关系如图所示,请回答下列问题:
(1)该酶作用的底物是________________。;(2)在140 min后,曲线变成水平,这是因为__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。
(3)若增加胰蛋白酶浓度,其他条件不变,请在原来图上画出生成物量变化的示意曲线。;(4)若胰蛋白酶浓度和其他条件不变,反应液pH由2逐渐升高到10,则酶催化反应的速度将________,原因是_______________________
____________________________________________________________________________________________________________
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