2019高三生物（苏教版）一轮课件：13.1 无菌操作技术实践.pptx

第1讲　无菌操作技术实践 -2- 自主梳理 核心突破 考向感悟 考点　微生物的培养和应用 1.培养基 (1)培养基的概念:为人工培养微生物而制备的适合微生物　　　　　、　　　　　或积累　　　　　　　的营养基质。  (2)培养基的营养构成:一般都含有水、　　　　(提供　　　元素的物质)、　　　　　(提供　　　　元素的物质)和　　　　等最基本的生命物质。  生长　 繁殖 代谢产物 碳源 碳 氮源 氮 无机物 (3)培养基的分类 -3- 自主梳理 核心突破 考向感悟 2.消毒和灭菌的比较 -4- 自主梳理 核心突破 考向感悟 3.细菌培养基的配制 (1) 牛肉膏蛋白胨培养基　是常用的培养细菌的基础培养基。  (2)配制过程: 配制培养基→调节pH→分装→包扎→灭菌　→搁置斜面。  (3)细菌培养基pH应调至 7.2　。分装时培养基的高度约为试管高度的 1/5　。 高压蒸汽灭菌　是常用的灭菌方法之一。温度为 121　 ℃,气压为 100　 kPa,灭菌 20~30　 min。搁置斜面时,斜面长度不超过试管总长的 1/2　。  -5- 自主梳理 核心突破 考向感悟 4.无菌操作和接种技术 (1)接种:通常把在 无菌　条件下将微生物接入培养基的操作过程叫做接种。  (2)接种工具:接种环用于 斜面接种,或在固体培养基平板上进行划线接种　;接种针用于 穿刺接种　;玻璃涂布器用于 涂抹平板接种　。  (3)微生物接种和培养的关键:无菌操作。培养微生物用的 试管　、 培养皿　和微生物 培养基　等,在接种之前都需要进行 灭菌　,接种操作通常还需要在 酒精灯火焰　附近进行。  (4)接种与培养大肠杆菌。 -6- 自主梳理 核心突破 考向感悟 5.微生物的分离和培养 (1)原理:在实验室中利用　　　　　　　培养基可以筛选和分离出某种微生物,然后在高度稀释的条件下,在　　　　　　　培养基上培养该微生物形成　　　　　　　　　,即为纯培养物。  (2)方法 ①最常用的方法:　　　　　　　　　　　　,又包括涂布平板法和　　　　　　　　　　。  ②选择培养分离:科学家针对某种微生物的特性,设计一个特定的环境,使之特别适合这种微生物的生长,而抑制其他微生物的生长。这种通过　　　　　　　　　进行微生物纯培养分离的技术,称为选择培养分离。  选择 固体 单个菌落 平板分离法 混合平板法 选择培养 -7- 自主梳理 核心突破 考向感悟 (3)土壤微生物的分离和计数 ①准备实验器材;②采集土壤,制备悬液;③选择适于分离特定微生物的培养基;④接种,从浓度最低的土壤悬液开始,用无菌移液管吸取1 mL加入到有相应标记的培养皿,再用不同的无菌移液管分别从不同浓度的悬液中吸取1 mL加入到有相应标记的培养皿中,每个浓度设置3个重复,采用　　　　　　　　　法进行分离;⑤培养与观察。  涂布平板 -8- 自主梳理 核心突破 考向感悟 (1)据物理状态的不同,培养基只有液体培养基和固体培养基两种类型。(　　) (2)用平板划线法纯化大肠杆菌时不同阶段灼烧接种环的目的相同。(　　) × 提示:根据物理状态的不同,培养基可分为液体培养基、半固体培养基和固体培养基三种类型。 × 提示:①第一次操作:杀死接种环上原有的微生物;②每次划线之前:杀死上次划线后接种环上残留的菌种,使下次划线的菌种直接来源于上次划线的末端;③划线结束后:杀死接种环上残存的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者。 -9- 自主梳理 核心突破 考向感悟 (3)如果要分离土壤中能分解尿素的微生物,可采用唯一氮源为尿素的培养基。(　　) (4)微生物对pH的要求不同的原因是不同微生物所含的酶的最适pH不同。(　　) √ √ 提示:不同的微生物体内的酶所需的最适pH不同。 -10- 自主梳理 核心突破 考向感悟 1.培养基的成分 -11- 自主梳理 核心突破 考向感悟 -12- 自主梳理 核心突破 考向感悟 2.培养基的种类和用途 -13- 自主梳理 核心突破 考向感悟 -14- 自主梳理 核心突破 考向感悟 3.三种常用灭菌方法的比较 -15- 自主梳理 核心突破 考向感悟 4.微生物的纯化培养技术 (1)原理:在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞,使其长成单个的菌落,这个菌落就是纯化的细菌菌落。 (2)微生物接种方法 ①平板划线法:平板划线法中细胞的分离和稀释过程发生在接种环在固体平板表面上的划线和移动过程中。在线的开始部分,微生物往往连在一起生长,随着划线的进行,菌数逐渐减少,最后可形成纯种的单个菌落。 -16- 自主梳理 核心突破 考向感悟 ②涂布平板法:系列稀释操作。 a.将分别盛有9 mL水的6支试管灭菌,并按10~106的顺序编号。 b.用移液管吸取