蛋白质人工抗体微粒之制备及其特性分析-高雄大学.pdf

蛋白質人工抗體微粒之製備及其特性分析 1 2 3 1,* 曾弘毅 、林宏殷 、袁菁 、李玫樺 1 2 義守大學材料科學與工程學系 國立高雄大學化學工程與材料工程學系 3 國立高雄大學環境與土木工程學系 (NSC 95-2220-E-390-001-) 分子拓印高分子已被廣泛應用於親合分離 、模仿抗體和受體結合 、酵素催化及生物感測等 。本研 究以白蛋白(Albumin)為目標分子 ，使用不同的交聯劑 （cross-linker ）種類 ，以紫外光照射後即可 得白蛋白分子拓印高分子微粒 。在電子顯微鏡照片中發現分子拓印高分子微粒 ，如以 EGDMA （Ethylene glycol dimethacrylate ）製備的微粒之平均粒徑為 56.7± 11.1 nm 比 TEGDMA （Tetra ethylene glycol dimethacrylate ）的平均粒徑小 ，約為 157.9±40.9 nm 。測試高分子微粒的再吸附性 時 ，發現以 EGDMA 或 TEGDMA 為交聯劑時 ，所得到的分子拓印和非分子拓印高分子微粒 ，其 吸附白蛋白的量分別為 1.2 及 2.7 倍 。 關鍵字 ：蛋白質拓印高分子 、白蛋白 、交聯性單體 (1) 前言 擇亦為製備高選擇性拓印高分子的重要因素[5] ，本研究以 抗體是免疫系統用來鑒別和抑制外源物質(例如細菌和 不同的交聯劑 ，以乳化聚合的方式對白蛋白進行分子拓印 ， 病毒)的一種蛋白質複合體 ，每種抗體只識別特定的目標抗 並利用高分子微粒進行再吸附實驗 。 原[1]。而分子模印技術(Molecular imprinting technique)是依 照 Pauling 與 Campbell 所提出的抗體形成理論 ，該理論描 (2) 實驗方法 述在抗原分子與周圍產生自組性(self-assembly)圍繞的抗體 2.1 實驗藥品與儀器 分子之間的關係 ，可以視為與抗原分子本身之特異性互補的 牛血清白蛋白(Albumin from bovine serum, minium 98%) 結合[2] 。 購自Sigma-aldrich 。2,2-Azobisisobutyronitile (AIBN)生產於 分子模版高分子(molecular imprinting polymer, MIP)即 Tokyo Chemical Industry (Tokyo, Japan) 。不同的交聯劑包括 是專為特定的抗原分子所設計出來的辨識系統 ，其製備過程 乙二醇二甲基丙烯酸酯 （Ethylene glycol dimethacrylate, 包括使用功能性單體、交聯性單體和目標分子以自組性的親 EGDMA ）；聚四乙二醇二甲基丙烯酸酯 （Tetra ethylene 合組裝 ，在進行聚合反應後形成可辨識形狀及官能基的辨識 glycol dimethacrylate, TEGDMA ）是訂購於Fluka （Seelze, 孔洞[3, 4] 。 Germany) ；聚乙二醇400二甲基丙烯酸酯（polyethylene glycol 白蛋白(Albumin)在人體中可維持血液滲透壓 ，白蛋白佔 400 dimethacrylate, PEG400DMA)和聚乙二醇600二甲基丙 全部血漿蛋白的 50%