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高二选修3学习提纲（教案） 第一章：基因工程 一、基因工程 1. 概念及基本工具 概念：按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过________和________等技术，赋予生物以新的________，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型或生物产品，又叫________技术。 2. 基因工程的基本操作程序 二、蛋白质工程 目标：根据人们对蛋白质________的特定需求，对蛋白质的________进行分子设计。 原理：基因改造 基本途径：预期蛋白质功能→设计蛋白质结构→推测应有_________序列→找到对应的________序列(基因) 【自我校对】 一、1. 体外DNA重组 转基因 遗传特性 DNA重组 限制性核酸内切酶 某种特定的核苷酸序列 磷酸二酯键 黏性末端 平末端 黏性末端 黏性末端 平末端 平末端 λ噬菌体的衍生物 2. PCR技术 引物 DNA聚合酶 指数 启动子 首端 RNA聚合酶 终止子 尾端 鉴别受体细胞中是否含有目的基因 农杆菌转化法 花粉管通道法 显微注射技术 DNA分子杂交技术 抗原—抗体杂交法 3. （1）Bt毒蛋白基因 蛋白酶抑制剂基因 病毒外壳蛋白抗毒素合成 渗透压调节 抗除草剂 （2）肠乳糖酶 乳腺蛋白基因的启动子 （3）正常基因 二、功能 结构 氨基酸 脱氧核苷酸 基因工程的工具 1. 几种酶的比较 限制性核酸内切酶与DNA连接酶的比较 1 　　　项目 种类　　　 作用底物 作用部位 作用结果 限制酶 DNA分子 磷酸二酯键 形成黏性末端或平末端 DNA连接酶 DNA分子片段 磷酸二酯键 形成重组DNA分子 DNA聚合酶 脱氧核苷酸 磷酸二酯键 形成新的DNA分子 DNA(水解)酶 DNA分子 磷酸二酯键 形成脱氧核苷酸 DNA解旋酶 DNA分子 碱基对间的氢键 形成单链DNA分子 限制性核酸内切酶与DNA连接酶的比较 限制性核酸内切酶 DNA连接酶 E·coli DNA 连接酶 T4DNA 连接酶 来源 大多是原核生物 大肠杆菌 T4噬菌体 作用 (1)识别双链DNA分子的特定核苷酸序列 (2)切开特定部位的两个核苷酸间的磷酸二酯键 双链DNA片段互补的黏性末端之间连接 既能连接双链DNA片段互补的黏性末端，也连接平末端，但后者效率低 结果 形成黏性末端或平末端 “缝合”互补的双链DNA片段 实质 使特定部位的两核苷酸间的磷酸二酯键断开 恢复被限制酶切开了的两核苷酸之间的磷酸二酯键 1. 限制酶不切割自身DNA的原因是：原核生物不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰。 2. DNA连接酶起作用时不需要模板。 2. 载体 (1)作用 ①将目的基因转移到宿主细胞内。 ②利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量复制。 (2)具备的条件 ①能在宿主细胞内稳定保存并大量复制。 ②有多个限制酶切割位点。 ③具有特殊的标记基因，以便进行筛选。 导入的目的基因的表达需要调控序列，因此在插入目的基因的部位之前需有启动子，之后需有终止子。 (3)种类 ①质粒：独立于细菌拟核DNA之外，能够自我复制的很小的双链环状DNA分子。 ②λ噬菌体的衍生物。 ③动植物病毒。 【例1】　(2010·江苏高考·T27)下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题： 限制酶 BamH Ⅰ Hind Ⅲ EcoR Ⅰ Sma Ⅰ 识别序列及 切割位点 G↓GATC C C CTAG↑G A↓AGCT T T TCGA↑A G↓AATT C C TTAA↑G CCC↓ GGG GGG↑CCC (1)一个图1所示的质粒分子经Sma Ⅰ切割前后，分别含有________个游离的磷酸基团。 (2)若对图中质粒进行改造，插入的Sma Ⅰ酶切位点越多，质粒的热稳定性越________。 (3)用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用Sma Ⅰ切割，原因是________________。 (4)与只使用Eco RⅠ相比较，使用Bam HⅠ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止________。 (5)为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入________________酶。 (6)重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了________。 (7)为了从cDNA文库