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猪小肠黏膜下基质在组织重建中的研究进展 沈阳医学院JournalofShenyangMedicalCollege第13卷第2期2011年6月 猪小肠黏膜下基质在组织重建中的研究进展 金娟,田伟 (1.沈阳医学院基础医学院2008级临床医学4班,辽宁沈阳110034;2.解剖学教研室) [关键词]小肠黏膜下基质;组织工程;支架材料 [中图分类号]R318[文献标识码]A[文章编号]1008—2344(2011)02一Ol19—03 小肠黏膜下基质(smallintestinesubmucosa, SIS)是一种不含细胞的天然细胞外基质材料.它 有良好的细胞相容性,可促进多种细胞在材料上 的黏附,生长和分化¨J.在超过1000次的跨种 交叉移植实验中,均表现为无免疫原性,而且直 接免疫激惹实验无应答反应.体内降解速度也较 快.与合成材料相比,所提供的环境和纤维结构 更有利于细胞的生存,扩展及新陈代谢J.如将 SIS植入宿主体内,可迅速诱导细胞浸润,刺激血 管生成和宿主细胞生长分化,产生的再生组织在 结构和功能上均与原有组织相似.研究表明SIS基 本符合组织工程理想支架材料的条件,极有可能 在组织体内完全再生.已用于包括血管在内的多 种组织的重建.本文就近年来诸多学者对SIS 作为组织工程学中支架材料的研究报道加以综述. 1SiS特性与优点 SIS由一层致密的结缔组织构成,其主要成份 为I和Ⅲ型胶原纤维,另含有少量V和Ⅵ型胶原 纤维,所含细胞较少.SIS含有多种生长因子,对 组织的修复重建及细胞的生长有重要作用,其结 构非常有利于细胞的黏附,增殖和分化,并且能 刺激细胞分泌胶原等,因而具有良好的生物相容 性和适当的机械特性,能承受周围组织压力,为 再生细胞提供足够的生长空间,能迅速诱导细胞 浸润,刺激血管生成和宿主细胞的长人和分化, 逐渐完全降解,产生的再生组织在结构和功能上 均与原有组织相似. 2SIS制备 2.1物理方法处理取经过检疫的健康成年猪的 空肠,运输过程中将小肠冰冻冷藏,在4h内完成 清洁过程.用裹有纱布的刀柄去除小肠的浆膜层 和肌层,其问持续用40℃水冲洗…. [通讯作者]田伟(1972一), 向:皮肤组织工程学.E—mail: 男(汉).博士,副教授.研究方 tianjiakang1999@yahoo.con.c 2.2化学方法处理按Abraham方法进行脱细 胞和消毒,灭菌处理物理方法处理后的小肠.既 没有细胞碎屑,又不损害小肠黏膜下层胶原的成 分,降低免疫反应的程度,适合作修复材料131. 3SIS在组织重建中的应用 3.1体外构建组织工程骨膜的实验研究取2月 龄新西兰大白兔,自胫骨上段前内侧穿刺抽取骨 髓4ml,制成骨髓间充质干细胞(bonemesencby— realstemcell,BMSC)悬液,并传代培养.将传至 第三代的细胞与SIS材料复合.相差显微镜观察: 第7d后材料周围有较多细胞直接贴附于材料边 缘.10d后大量细胞聚集材料边缘.细胞形态多为 梭形及多角形.扫描电镜观察:复合培养5d,细 胞散在材料表面,呈长梭形或不规则形,细胞间 无连接.胞体表面有颗粒状物,可见微丝形成并 附着在材料表面.培养7d以后细胞数量明显增 多,细胞分泌旺盛,细胞间有大量胶原纤维丝, 形成细胞间连接.部分细胞跨越孔隙,呈长梭形, 有些正在分裂,有些重叠生长.培养10d以后细 胞数量增多连成一片.2周时细胞数量更多,细胞 层数也逐渐增加.细胞分裂增殖呈三维生长,细 胞分泌大量细胞外基质,开始呈蜂窝状,缝隙逐 渐被细胞外基质填塞而变得致密,细胞轮廓也变 得模糊.SIS与BMSC复合培养4周,细胞通过细 胞外基质紧密连接,结构连接致密.材料表面有 多层细胞附着,增殖.McDevitt等从SIS中提 取出转化生长因子.B,尽管在制备过程中经受过 消毒,冻干等处理,仍具有生物活性,既可以促 进BMSC分化,增殖,又能刺激成骨细胞和成软 骨细胞增殖,增加I型胶原,骨连接蛋白和骨桥 蛋白合成.SIS与BMSC在体外复合培养可以构建 出类似生物骨膜的组织工程骨膜,为进一步研究 体内成骨奠定了基础¨. 3.2尿道结构和功能重建方面的实验研究应用 猪小肠黏膜下层进行兔尿道缺损修补.SIS具有良 好的促再生特性,应用SIS修复的尿道缺损,可减 ? l20?沈阳医学院第13卷 少尿瘘和尿道狭窄的发生,术后4周可见上皮细 胞再生,新生血管长人;术后l2周其基本组织结 构与正常尿道无明显差异,行逆行尿道造影显示, 再生尿道的管腔与正常尿道无明显差异,表明SIS 作为尿道修复重建的替代材料,不仅能实现组织 学再生,而且可同时实现功能的重建¨. 3.3修复兔下颌骨缺损的实验研究用猪SIS与 纳米p一磷酸三钙(p?tricalciumphosphat