转基因克隆动物演示教学.pptVIP

基因工程产生的问题： 价格高? 只能生产简单的小分子担保，不能生产有着复杂结构的大分子蛋白? 环境污染？ 数量有限？ 第一节 转基因动物 一、概述 转基因动物（transgenic animal):用人工方法将外源DNA导入或整合到动物基因组内，并能稳定传代的动物。 1982年 Brinster Palmiter 大鼠生长激素基因导入小鼠受精卵 supermice 各种转基因生物 二、基本原理 外源基因构成 顺式作用元件+结构基因+报告基因（融合基因） 报告基因常为 荧光素酶、β-半乳糖苷酶和绿色荧光蛋白（GFP) 外源基因的引入 显微注射 注射入受精卵 结合克隆生产转基因动物 胚胎干细胞法 逆转录病毒感染法 精子载体法 发育 植入受体动物的子宫或输卵管 转基因动物中外源基因的检测 Southern杂交、Northern杂交、Western印迹 三、基本方法 1. 显微注射法 优点: 导入速度快、操作简单对DNA大小无限制 缺点: 实验设备昂贵 简化流程 目的DNA制备——基因工程 准备假孕母鼠（养母） 准备供体母鼠——提供受精卵 显微注射入雄性原核 植入养母子宫、输卵管 外源基因整合及表达检测 通过互交、回交等育种手段获得纯合子 传代纯合子转基因鼠（若外源基因的整合发生在细胞分裂后则只能得到嵌合体小鼠） 注射量仅一微微升 2 结合克隆生产转基因动物 克隆胚胎发育阶段 去核过程 注射过程 各种克隆动物 3. 胚胎干细胞法——ES细胞 特点： ES具有全能性。 简化流程 获取ES细胞 稳定传代防止分化 转化ES细胞（引入新基因、诱导基因突变、基因组改造等）筛选后克隆 注射入囊胚期的胚胎中 植入养母子宫，筛选嵌合体子代 通过回交、互交等育种手段获得纯合子后代 稳定传代 4. 逆转录病毒感染法 主要适合于家禽类，其受精卵在出生时已发展至桑椹胚期 5. 精子载体法 将外源DNA吸附到精子中 洗涤精子 电穿孔法、脂质体转染法等 优点：便宜 机制未明：怀疑与CD4蛋白有关 注射过程 去核过程 四、转基因动物的可能应用 基因产品的制备——生物制药 使用乳球蛋白的启动子可以使外源基因在乳腺中特异表达 异种器官移植——转基因猪（实验阶段） 建立人类疾病动物模型等 高脂血症（HLP）、AS、高血压、低血压等心血管疾病的转基因动物模型已成功建立 培育新品种 加速生长 抵抗疾病 扩大生存范围——耐寒能力等 2009，美国明尼苏达州立大学干细胞科学家桃瑞丝－泰勒，，最新培育的人造心脏能够像正常老鼠体内的心脏一样跳动，但这种心脏看上去更加与众不同：它覆盖着一层老鼠心脏去细胞组织的“脚手架”，而且新培育的老鼠心脏组织是基于另一只老鼠的干细胞培育而成。 2015-九月，屈雷采用CRISPR技术在 《科学报告》(Scientific Reports，Nature集团出版)发表了他们的研究成果。早期的山羊胚胎中敲除了两个抑制羊毛和肌肉发育的基因，从而得到了10只肌肉更粗壮、羊毛更长的小山羊，到目前为止，这些定制山羊并没有出现任何异常。 2015-四月，一支中国科研团队在Protein Cell 期刊在线发表了论文，他们尝试利用CRISPR技术改造无法存活的人类胚胎(这些胚胎是经许可后从一家生育诊所获得的)，由此而饱受批评和担忧。他们的研究目的是删除β-地中海贫血相关基因且不造成其他突变，但这一实验在85个胚胎上进行尝试后以失败而告终。 休无休时，了无了时 人肯当下休，便当下了。若要寻个歇处，则婚嫁虽完，事亦不少。僧道虽好，心亦不了。前人云：“如今休去便休去。若觅了时无了时。”见之卓矣。 Call a spade ，a spade 实事求是 A fall in pit a gain in wit 吃一堑长一智 The man who has made up his mind to win will never say “impossible” 一个决心取胜的人从来都不会说“不可能” Four short words sum up what has lifted most successful individuals above the crowed :a little bit more 成功的秘诀就是四个简单的字：多一点点（凡事比别人多一点点，多一点努力多一点实践多一点疯狂，多一点点就能创造奇迹） 你是一个富翁 如果早上醒来，你发现自己还能自由呼吸，你就比在这一周离开人世的100万人更有福气。 如果你从未经历过战争的危险、被囚禁的孤寂、受折磨的痛苦和忍饥挨饿的难受、你已经好过世界上5亿人。 如果你的冰箱里有食物，身上有足够