结核分枝杆菌ftsz的异源表达及酶学性质研究-生命科学研究.pdfVIP

20 卷 6 期 生命科学研究 灾燥造援20 晕燥援6 年 月 圆园16 12 蕴蚤枣藻 杂糟蚤藻灶糟藻 砸藻泽藻葬则糟澡 Dec. 圆园16 DOI ：10.16605/ki.1007-7847.2016.06.004 结核分枝杆菌FtsZ 的异源表达及酶学性质研究 斌玲 王爱莲 高承贤 闵真真 钱朝东 田应蓉 陈建真* , , , , , , ( 江中医药大学 药学院，中国浙江 杭州 310053) 要 作为细菌分裂所必需的微管蛋白类似物 丝状温度敏感蛋白Z (filamentous temperature-sensitive protein Z, FtsZ)被认为是一个具有潜力的药物作用新靶点 为了构建高纯度的FtsZ 重组蛋白分离纯化体系 探讨其酶 遥 学性质 该研究利用大肠杆菌BL21 异源表达结核分枝杆菌FtsZ 重组蛋白 通过Ni 亲和层析柱和G-50 层析 柱纯化目的蛋白 采用孔 石绿法和90 光散射法测定FtsZ 重组蛋白的GTP 酶活和蛋白聚集 研究结果表明 遥 院 成功获得具有生物学活性的结核分枝杆菌FtsZ 重组蛋白 其相对分子质量约为49 kD 曰该酶最适反应温度为 37 最适pH 为6.8 金属离子Mg2+ 和K+ 对FtsZ 重组蛋白酶活具有促进作用 有机溶剂DMSO 和Triton X-100 的体积分数分别高于0.1%和0.005%时对酶活有显著抑制作用(P0.05)遥 此外 FtsZ 重组蛋白在加入底物GTP 诱导后 快速聚集 本实验利用基因工程技术成功获得具有生物活性的FtsZ 重组蛋白 并明确了该蛋白质的酶 遥 学性质 为其进一步的研究和应用奠定了基础遥 关键词 结核分枝杆菌 丝状温度敏感蛋白Z (FtsZ) 异源表达 分离纯化 酶活 蛋白聚集 曰 曰 曰 曰 曰 中图分类号 Q75 文献标识码 A 文章编号 1007-7847(2016)06-0486-06 Heterologous Expression and Characterization of FtsZ from My cobacterium Tuberculosis DAI Bin-ling, WANG Ai-lian, GAO Cheng-xian, MIN Zhen-zhen, QIAN Chao- dong, TIAN Ying-rong, CHEN Jian-zhen* (College of Pharmacy, Zhej iang Chinese Medical Univ ers ity, Hangz hou 310053, Zhej iang, China) Abstract: Filamentous temperature-sensitive protein Z (FtsZ), a tubulin-like ba