mirna鄄21种子序列反义核酸及抗多发性骨髓瘤应用-生命科学研究.pdfVIP

17 卷 6 期 生命科学研究 灾燥造援员7 晕燥援6 圆园13 年 12 月 蕴蚤枣藻 杂糟蚤藻灶糟藻 砸藻泽藻葬则糟澡 Dec. 圆园13 miRNA 21 种子序列反义核酸 及抗多发性骨髓瘤应用 骆小闯, 丰茂晓, 古春明, 朱容萱, 陈欣然, 费 嘉* (暨南大学 医学院, 中国广东 广州 510632) 摘 要: 成熟microRNA 的种子序列通过与其靶mRNA 的3鄄UTR 区完全互补 合, 发挥负性调节作用. 针对 miR鄄21 的种子序列设计并合成8 个碱基的微小反义核酸 (tiny anti鄄miR鄄21, t鄄antimiR鄄21), 研究t鄄antimiR鄄21 对 多发性骨髓瘤的抑制效应. 利用LipofectamineTM 2000 转染多发性骨髓瘤RPMI鄄8266 细胞系, 激光共聚焦显微 镜检测荧光标记的反义寡核苷酸的细胞内定位, 流式细胞仪检测转染效率; 四甲基偶氮唑蓝(MTT) 法测细胞增 殖抑制率; 台盼蓝拒染法测活细胞数; Annexin V/PI 双染流式细胞仪检测细胞凋亡率. 果显示: t鄄antimiR鄄21 主要定位于细胞质, 与antimiR鄄21 具有相同的转染效率, 但是t鄄antimiR鄄21 转染后降解较快. t鄄antimiR鄄21 显著 抑制细胞增殖和促进细胞凋亡, 最佳作用浓度为0.4 滋mol/L, 最佳作用时间为48 h. 果表明t鄄antimiR鄄21 可 用于血液系统相 肿瘤的实验治疗, miRNA鄄21 可作为多发性骨髓瘤基因治疗的潜在靶点. 关键词: miRNA鄄21; 多发性骨髓瘤; 种子序列; t鄄antimiR鄄21; RPMI鄄8266 细胞; 反义核酸 中图分类号: R34 文献标识码: A 文章编号: 1007鄄7847(2013)06鄄0502鄄06 Antisense Oligonucleotides Targeting Seed Sequence of miR 21 and its Applications in Multiple Myeloma LUO Xiao鄄chuang, FENG Mao鄄xiao, GU Chun鄄ming, ZHU Rong鄄xuan, CHEN Xin鄄ran, FEI Jia* (Medical College, Jinan Univers ity, Guangz hou 510632, Guangdong, China) Abstract ：The seed sequence of mature miRNA took negative effects through perfectly binding with 3忆鄄 UTR of target mRNA. According to the seed sequence of miR鄄21, tiny antimiR鄄21 (t鄄antimiR鄄21) was de鄄 signed and synthesized to investigate the inhibition effects of multiple myeloma. t鄄antimiR鄄2 1 was transfected by LipofectamineTM 2000 into RPMI鄄8266 cells. The localization and transfection efficiency we