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医学文献通报 2012 年第1 期 医学文献通报 （检 验 医 学 ） 2012 年第1 期 本期概览 综述与述评 沙门菌分子分型方法研究进展„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„2 糖化血红蛋白检测方法研究进展„„„„„„„„„„„„„„„„„„„4 溶菌酶测定方法的研究进展„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„6 一般技术„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„10 血液学检验„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„12 尿液检验„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„18 粪便检验„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„19 脑脊髓液检验„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„20 微生物学检验„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„20 免疫学检验„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„24 主管单位：北华大学图书馆 主办单位：北华大学图书馆参考咨询服务部 联系方式 1 医学文献通报 2012 年第1 期 沙门菌分子分型方法研究进展 综述与述评 张东方，袁飞，陈颖，葛毅强，杨海荣，暴书婵，赵勇胜 [关键词] 沙门菌; 分子分型方法; 综述 [中图分类号] R 446. 5 [文献标志码] A [文章编号] 1001-0580 沙门菌引起的食源性疾病是危害人类健康的重大隐患，被列为首选控制的食源性致病菌。沙门菌属型别复杂，传统 的分型方法大多是通过表型鉴定，如依据菌体表面脂多糖、鞭毛抗原分别携带的 O、H 抗原等，包括生化反应、耐药性、 血清学、噬菌体分型等方法，直接体现了菌株的不同来源、不同致病性或表观特征差异，但是这些分型方法存在分型率 低、重复性差、操作繁琐，以及分辨能力不强等缺点，存在较大的局限性。近年来，随着分子生物学手段的不断发展， 从分子水平( 核酸、蛋白质) 对细菌进行分型鉴定已经成为可能，可以根据细菌在核酸、蛋白质等生物大分子结构上的 差异，分析不同时期、不同地域、甚至不同流行事件中菌株间基因组的相似程度。本文对近年来常用的沙门菌分子分型 技术进行比较并对这些技术的研究进展作一综述，旨在为食品中沙门菌的快速分型提供一些参考。 1 基于蛋白质水平的沙门菌分子分型方法 1. 1 全细胞蛋白电泳 蛋白质是基因表达的产物，通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳( sodium dodecyl sulfate-poly-acrylamide gel electrophoresis，SDS) 的全细胞蛋白电泳，可将细菌中及菌体表面各种蛋白质 进行分离。早期，很多学者利用 SDS对不同的菌株进行聚类，但是，基于全细胞进行蛋白电泳，与表观分型方法 相似，均无法对菌株的亲缘关系及致病性特征进行深入分析，故近年来该方法使用较少。 1. 2 多位点酶电泳( multilocus enzyme electrophoresis，MLEE) MLEE 是一种早在20 世纪60 年代就已经建立的方 法，根据细菌内部多种代谢相关酶的电泳迁移率的不同来描述细菌的变异。由于蛋白电泳的泳动度是由蛋白质的氨基酸 序列(分子量和电荷)和结构所决定，而一种酶的序列结构变化与决定该酶的遗传结构位点上的等位基因直接相关，通过 检测酶蛋白的电泳多态性反映基因位点的多态性，从而达到细菌分型鉴定的目的。研究表明，MLEE 分型方法具有特异 性好、方法简便、分辨力高的优点。随着测序技术的发展，逐步形成了基于直接测定核苷酸序列的多位点序列分型技术 方法，后者在细菌品种鉴定和分型中应用越来越广泛。 1. 3 基质辅助激光解吸 / 电离飞行时间质谱( matrix assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry ，MAL-D